一、金雀异黄素对终末糖基化产物刺激大鼠系膜细胞终末糖基化产物受体表达的影响（论文文献综述）
姜婷,滕士超,安晓飞,易丽[1]（2022）在《中医药干预AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病的机制研究概述》文中提出糖尿病肾病发病机制复杂,晚期糖基化终末产物（advanced glycosylation end products,AGEs）-糖基化终末产物受体（receptor of AGEs,RAGE）信号通路是糖尿病肾病的重要发病通路之一,也是近年来的研究热点。中医药治疗糖尿病肾病有一定的优势,研究表明中医药可通过干预AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病患者的临床症状,延缓病情进展。中医药通过抑制AGEs形成,减少AGEs-RAGE轴的激活,减少细胞外基质积聚、延缓肾纤维化,保护肾小球滤过膜,减轻糖尿病肾病病理损伤;中医药抑制RAGE表达,减轻AGEs-RAGE轴及其下游信号通路对肾脏的损伤;中医药阻断了氧化应激与AGEs-RAGE轴之间的的反馈通路,拮抗氧化应激,降低活性氧（reactive oxygen species,ROS）等氧化物水平,同时可增加超氧化物歧化酶（superoxide dismutase,SOD）、过氧化氢酶（catalase,CAT）等抗氧化指标,保护肾功能;中医药抑制AGEs-RAGE信号通路激活的炎症通道,抑制肾脏炎性反应,改善肾损伤;中医药改善AGEs-RAGE介导的内皮细胞损伤,减缓肾损害进展。本文就中医药干预AGEs-RAGE信号通路治疗糖尿病肾病的主要机制进行综述。
孙紫娟[2]（2021）在《血清AGEs及其受体Gal-3与2型糖尿病肾脏病的相关性研究》文中指出[目的]本研究通过收集2型糖尿病肾脏病（diabetic kidney disease,DKD）患者临床资料,检测血清糖基化终末产物（advanced glycation end products,AGEs）及其受体半乳糖凝集素-3（galectin-3,Gal-3）水平,探讨AGEs及Gal-3与DKD的相关性,以期为DKD早期诊治提供新策略。[方法]本研究随机收集2019年9月至2020年10月于昆明医科大学第一附属医院肾内科及内分泌科住院的非透析DKD患者80名作为研究对象,并收集同期肾内科住院的原发性肾小球肾炎（primary glomerulonepfritis,PGN）患者60名、内分泌科住院的2型糖尿病（type 2 diabeticmellitus,T2DM）患者15名及体检中心体检的健康人群15名作为对照组。根据CKD-EPICys公式估算肾小球滤过率（estimate glomerular filtration rate,eGFR）,将 DKD 组及 PGN 组分为G1～G5 期;根据尿白蛋白肌酐比值（urine albumin creatine ratio,UACR）将DKD组分为A2期及A3期。收集所有研究对象一般资料、临床常见指标,ELISA法测定血清 AGEs、Gal-3 及转化生长因子-β（transforming growth factor-β,TGF-β）水平。比较不同分组、DKD组eGFR不同分期、DKD组与PGN组eGFR相同分期、DKD组A2期与A3期上述指标的差异性,分析血清AGEs、Gal-3与DKD组临床指标及经典致纤维化因子TGF-β的相关性,探索影响DKD发生及DKD组与eGFR下降的相关危险因素,评估血清AGEs、Gal-3单独及联合用于DKD的诊断价值。[结果]1、四组间血清AGEs、Gal-3、TGF-β水平比较差异具有统计学意义（P<0.05）,DKD组血清AGEs、Gal-3水平均高于各对照组（P<0.05）,PGN组TGF-β水平较其它三组显着升高（P<0.05）。2、DKD组G1～G5期血清AGEs、Gal-3、TGF-β水平比较差异具有统计学意义（P<0.05）,G4、G5期较G1、G2期显着升高（P<0.05）,随着肾功能减退,血清AGEs、Gal-3、TGF-β水平呈逐渐上升趋势。3、DKD组A2期与A3期血清Gal-3及TGF-β水平比较差异具有统计学意义（P<0.05）,血清AGEs水平比较差异无统计学意义（P=0.056）。4、DKD组与PGN组eGFR相同分期比较,校正年龄后,血清AGEs水平在G2、G3、G5期,Gal-3水平在G2～5期以及TGF-β水平在G1～3期和G5期比较差异具有统计学意义（P<0.05）,DKD组各期AGEs、Gal-3水平均高于PGN组,PGN组各期TGF-β水平均高于DKD组。5、DKD 组血清 AGEs、Gal-3 水平与 Urea、Scr、UA、K、P 呈正相关关系（P<0.05）,与 RBC、Hb、FPG、Ca、eGFR 呈负相关关系（P<0.05）,血清 AGEs、Gal-3及TGF-β水平两两之间均存在正相关关系（P<0.001）。6、多因素二元logistic回归分析示FPG、AGEs及Gal-3是DKD发生的独立危险因素（P<0.05）。多元线性回归分析示DKD组患者eGFR下降程度有68.9%可由血清TGF-β、UA、K、P及尿UACR水平解释,回归方程具有统计学意义（F=35.991,P<0.001）。7、构建ROC曲线,AGEs及Gal-3单独用于诊断DKD的AUC分别为0.812及0.865（P<0.001）;AGEs联合Gal-3用于诊断DKD的AUC为 0.870（P<0.001）。[结 论]1、血清AGEs、Gal-3是DKD发生的独立危险因素且在DKD中高表达,提示可能参与DKD发生发展。2、DKD患者血清AGEs、Gal-3水平随着肾功能减退逐渐升高,提示同经典致纤维化因子TGF-β一样可作为DKD肾纤维化的评估指标。3、Gal-3作为AGEs受体,代偿性增高可增加AGEs降解及清除可能参与DKD的保护作用。4、血清AGEs、Gal-3单独及联合诊断DKD具有较好价值,提示今后可能成为早期诊断及新型治疗靶点的有效标志物。
何文娇[3]（2021）在《基于AGEs/RAGE通路的黄连解毒汤干预糖尿病肾病作用机制研究》文中研究指明糖尿病肾病（Diabetic nephropathy,DN）是一种由糖尿病引起的慢性肾脏病,是引起终末期肾脏疾病（End-stage renal disease,ESRD）的首要病因。黄连解毒汤是清热解毒的经典方剂,由黄连、黄芩、黄柏、栀子按照3:2:2:3组成。已有研究发现黄连解毒汤具有治疗糖尿病肾病的作用,然而其干预糖尿病肾病的作用机制研究却鲜见报道,有待于开展系统研究。因此,本课题开展了黄连解毒汤干预糖尿病肾病的药效学、网络药理学、作用通路及代谢组学研究,以期初步阐明黄连解毒汤干预糖尿病肾病的作用机制。本课题研究内容如下:1.黄连解毒汤干预糖尿病肾病的药效研究采用db/db小鼠作为糖尿病肾病动物模型,给予黄连解毒汤干预12周后,记录小鼠体重,并对生化指标、肾组织病理学和肾组织Nephrin和TGF-β1的表达进行综合性分析。生化指标结果表明,黄连解毒汤能有效改善db/db小鼠糖脂代谢紊乱和肾功能障碍;由HE、Masson和PAS病理切片染色结果可知黄连解毒汤可以改善db/db小鼠肾组织形态、纤维化和糖原累积状况;由免疫组化结果可知黄连解毒汤可以显着增加Nephrin的表达,抑制TGF-β1的表达,即黄连解毒汤可以减轻db/db小鼠足细胞损伤和肾组织纤维化程度。上述结果表明黄连解毒汤可通过改善db/db小鼠糖脂代谢紊乱、肾功能障碍、足细胞损伤及肾纤维化,从而发挥肾脏保护作用。2.黄连解毒汤干预糖尿病肾病的网络药理学研究以黄连解毒汤31个入血成分为研究对象,采用网络药理学方法,通过成分-疾病-靶点图、蛋白互作网络、GO分析和KEGG分析,预测黄连解毒汤干预糖尿病肾病的分子机制。结果显示黄连解毒汤干预糖尿病肾病的核心靶点为PIK3R1、PIK3CA、STAT3、AKT1和MAPK1等,GO和KEGG富集分析发现,黄连解毒汤可能通过刺激反应、细胞组成和受体活性等过程干预糖尿病肾病,其作用机制主要与AGEs/RAGE信号通路相关。3.基于AGEs/RAGE通路的黄连解毒汤干预糖尿病肾病的作用机制研究根据网络药理学预测结果,对AGEs/RAGE通路及其相关靶点进行分析;通过检测肾组织中SOD、GSH和MDA水平,发现黄连解毒汤能缓解db/db小鼠肾脏氧化应激损伤;ELISA试剂盒结果显示黄连解毒汤能显着降低db/db小鼠血浆和肾组织中AGEs含量。免疫荧光法和Western blot结果显示黄连解毒汤能增加GLO1表达,抑制RAGE蛋白表达,并能提高AKT磷酸化水平,激活Nrf2及其下游抗氧化因子HO-1,SOD2的表达。综合以上结果,表明黄连解毒汤能通过调控AGEs/RAGE通路,达到干预糖尿病肾病的作用。4.黄连解毒汤干预糖尿病肾病的尿液代谢组学研究采用UPLC-Q-Orbitrap HRMS/MS技术的代谢组学方法,研究黄连解毒汤对db/db小鼠尿液代谢物的影响。多元统计分析结果表明各组之间的尿液代谢物存在显着性差异,并鉴定了22个潜在生物标志物,黄连解毒汤干预后可显着回调17个潜在生物标志物的变化,涉及的代谢通路包括苯丙氨酸代谢、色氨酸代谢、糖代谢和鞘脂代谢等。综上所述,本课题揭示了黄连解毒汤具有改善糖脂代谢紊乱,改善肾功能障碍,抗肾脏纤维化及抗氧化等药理作用,并能通过调控AGEs/RAGE通路及调节苯丙氨酸代谢、色氨酸代谢、糖代谢和鞘脂代谢等发挥干预糖尿病肾病的作用。
张宗金,王悦芬,赵文景,崔方强,孟元,沈存,孙雪艳,王梦迪,刘梦超[4]（2020）在《基于轴探讨糖尿病肾病中医发病机制及治疗靶点》文中研究说明糖尿病肾病（Diabetes Nephropathy,DN）是糖尿病（Diabetes Mellitus,DM）患者常见的微血管并发症,也是引起终末期肾脏病的主要原因之一。高糖环境下,非酶糖化反应生成的晚期糖基化终末产物（Advanced Glycationend Products,AGEs）和晚期糖基化终末产物受体（Receptors for Advanced Glycation End Products,RAGE）的相互结合和作用是DN发生和进展的重要原因之一。研究发现,作用于AGEs-RAGE轴的不同位点可以改善DN的症状,中医药通过抑制非酶糖化,减少AGEs形成和抑制RAGE方面改善DN,AGEs-RAGE轴在DN发病中具有伏邪特征。基于近几年实验研究热点,结合AGEs-RAGE轴进行总结论述,阐释"邪伏膜原"发病机制假说及中医治疗DN的作用机制。
成林[5]（2020）在《参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠晚期糖基化终末产物的影响》文中进行了进一步梳理1.研究目的:本研究从整体、组织等综合评价不同干预方式对糖尿病大血管病变模型大鼠的影响,其中尤以AGEs为重点、对以伏邪理论为指导的参芪复方干预代谢记忆,保护大血管的作用机制进行探索。2.实验方法:将40只清洁级雄性SD大鼠随机分为正常组和造模组。采用高脂高糖饮食加腹腔注射STZ的方法进行造模;正常组大鼠则注射同等剂量的生理盐水。72小时后检测大鼠血糖,并以血糖值>16.7mmo1/L为标准判断模型是否成功。随后将血糖达标的大鼠以随机数字表法分成模型组、参芪复方组和二甲双胍组,并采用灌胃的方式对大鼠进行药物干预,具体剂量如下:参芪复方组1.44g/kg.d,二甲双胍组0.1g/kg.d,正常及模型组灌服生理盐水5.0ml/kg.d。8周后取材,对各组大鼠行胸主动脉形态学、血脂、OX-LDL、PAI-1、MDA、SOD、AGEs等病理检测。3.实验结果:1.一般情况:与正常组相比,模型组大鼠精神差、毛发干、行为反应慢,饮水与摄食量显着增多;治疗组一般情况虽不及正常组,但相较于模型组而言呈好转趋势。2.大鼠的胸主动脉形态:相较于正常组大鼠,模型组可见血管内皮细胞受损,且出现泡沫细胞;治疗组大鼠胸主动脉形态均得到相应改善,内皮细胞稍肿胀,可见少量泡沫细胞,受损状况介于正常组与模型组之间。3.大鼠空腹血糖及血脂:药物干预前,和正常组对比后发现,造模组大鼠的空腹血糖水平显着提高（P<0.01）;药物治疗后,相较于模型组而言,治疗组空腹血糖水平明显降低（P<0.01）;血脂方面,相较于正常组而言,模型组TC、TG含量增长明显（P<0.05）;和模型组对比后发现,治疗组血脂水平虽出现下降,但并无显着差异（P>0.05）。4.大鼠OX-LDL、PAI-1、MDA、SOD、AGEs水平:相较于正常组,模型组大鼠OX-LDL、AGEs含量显着增加（P<0.01）,PAI-1含量明显增加（P<0.05）,MDA水平虽有增加但差异不显着（P>0.05）,SOD含量则显着减少（P<0.01）;相较于模型组而言,二甲双胍组OX-LDL含量显着减少（P<0.01）,SOD含量增长明显（P<0.01）,PAI-1、MDA及AGEs水平虽有下降,但差异并不明显（P>0.05）;相较于模型组,参芪复方组PAI-1含量下降明显（P<0.05）,血清OX-LDL、MDA、AGEs浓度减轻,SOD含量提升,但均与模型组接近（P>0.05）。4.结论:1.参芪复方能对糖尿病大血管病变模型大鼠的精神状况、行为反应等一般情况产生影响,并减轻相应症状。2.以伏邪理论为指导的参芪复方可通过降低AGEs水平阻断代谢记忆,发挥保护大血管的作用。
南赫[6]（2020）在《基于肾络伏风病机的糖尿病肾脏疾病从风论治治法及其作用机制研究》文中研究指明研究一基于数据挖掘的糖尿病肾脏疾病从风论治治法研究目的通过研究导师赵进喜教授治疗糖尿病肾脏疾病的医案,揭示“从风论治”糖尿病肾脏疾病治疗思路的临床应用规律。方法在门诊及疗区收集赵进喜教授治疗糖尿病肾脏疾病的医案,利用EXCEL、SPSS、WE KA、UCINET等软件对医案当中的证候、症状、舌脉、处方药物等内容进行分析,其中针对处方药物进行频数分析、聚类分析、关联规则分析、社会网络分析,从而揭示“从风论治”糖尿病肾脏疾病治疗思路的临床应用规律。结果处方药物的社会网络分析结果显示,糖尿病肾脏疾病Ⅲ期的核心处方由益气养血、活血化瘀、祛风通络、清利湿热、清热泻火等药物组成,具体包括黄芪、当归、葛根、丹参、川芎、鬼箭羽、牛蒡子、穿山龙、蚕砂、土茯苓、萆薢、石韦、黄芩等;糖尿病肾脏疾病Ⅳ期的核心处方由益气养血、活血化瘀、祛风通络、清利湿热、清热泻火等药物组成,具体包括黄芪、当归、川芎、丹参、鬼箭羽、牛蒡子、穿山龙、蚕砂、土茯苓、萆薢、石韦、猪苓、茯苓、黄芩等;糖尿病肾脏疾病V期的核心处方由益气养血活血、升清降浊、通腑泄浊、健脾和胃、清利湿热、利水渗湿、祛风通络等药物组成,具体包括黄芪、当归、川芎、丹参、蝉蜕、僵蚕、姜黄、大黄、香附、苏叶、陈皮、半夏、土茯苓、萆薢、石韦、猪苓、茯苓、鬼箭羽、牛蒡子、穿山龙、蚕砂等。聚类分析和关联规则分析结果主要显示常用的药对和药物组合,具体包括益气养血活血的药物组合黄芪、当归、川芎、丹参;健脾和胃祛湿的药物组合陈皮、半夏、苍术、炒白术;补肾强腰的药物组合续断、桑寄生;疏风清肝明目的药物组合桑叶、菊花、夏枯草;清利湿热药物组合萆薢、石韦、土茯苓,金钱草、虎杖,蛇草、半枝莲;利水渗湿的药物组合茯苓、猪苓;升清降浊、泄浊解毒的药物组合蝉蜕、僵蚕、姜黄、熟大黄;交通心肾的药物组合黄连、肉桂等。结论赵进喜教授在治疗糖尿病肾脏疾病时重视益气养血、活血化瘀、祛风通络、清利湿热等治疗方法贯穿各个疾病分期的始终。针对肾络风动的病机,赵进喜教授所应用的药物组合为鬼箭羽、牛蒡子、穿山龙、蚕砂;针对肝风内动,应用生龙骨、生牡蛎;针对肢体络脉风动,应用鸡血藤、青风藤、地龙、水蛭;针对目络风动,应用桑叶、菊花、夏枯草。除以上的常用风药之外,在其他的常用药对和药物组合当中也出现了各种风药,体现着赵进喜教授在治疗糖尿病肾脏疾病时重视从风论治的学术特点。研究二基于网络药理学的益气祛风通络法治疗糖尿病肾脏疾病作用机制研究目的用网络药理学分析方法筛选益气祛风通络方（黄芪、鬼箭羽、牛蒡子、穿山龙、蚕砂）的药物活性成分及作用靶点,并对靶点进行通路富集分析,从而预测其作用机制。方法在 TCMSP 数据库官网检索“huang qi”、“gui jian yu”、“niu bang zi”、“chuan shan long”、“can sha”,再通过查阅相关文献对药物活性成分数据进行补充。将上述文件导入Swiss Target Prediction数据库,获得处方活性成分的潜在作用靶点信息。在疾病基因关联数据库（DisGeNET）中以“Diabetic nephropathy”作为关键词进行检索,获取与糖尿病肾脏疾病相关的基因及靶点蛋白信息。用Venny2.1在线软件绘制韦恩图,最终得到处方药物与疾病的共同靶点。将益气祛风通络方的活性成分、益气祛风通络方与糖尿病肾脏疾病共同靶点等数据输入Cytoscape软件中,绘制出“益气祛风通络方-活性成分靶点-糖尿病肾脏疾病的疾病靶点”相互作用的网络图。将处方与疾病共同靶点数据导入STRING数据库进行检索,构建PPI网络图,并根据蛋白之间的关联度进行排序。对益气祛风通络方与糖尿病肾脏疾病共同靶点进行关键靶基因GO与KEGG功能富集分析。结果在处方—活性成分—疾病靶点网络图分析结果当中,山萘酚具有降血糖、抑制糖基化终末产物产生等作用;异鼠李素具有抗炎、降血糖等作用。药物-疾病共同靶点中,S HBG水平降低与2型糖尿病的发生有一定相关性。PPI网络图结果显示的MAPK1又称为细胞外信号调节激酶2（ERK2）,是ERKs信号通路的关键激酶;MAPK14是P38MAPK蛋白家族当中的P38 α,是P38MAPK信号转导通路当中的重要蛋白;AKT1是AKT家族的重要成员,是PI3K/AKT信号通路的重要激酶;STAT1、STAT3、JAK2均为JAK/STAT信号通路的重要蛋白;TNF、IL2均为参与机体免疫炎症反应的重要细胞因子;ICAM1为细胞间黏附分子,能够促进炎症细胞在炎症反应局部的黏附。GO分析结果显示益气祛风通络方治疗糖尿病肾脏疾病的机制可能与PI3K/AKT信号通路、MAPK信号通路密切相关。KEGG功能富集分析结果显示,共同靶点主要富集于糖尿病、肿瘤、感染等多种疾病,其中近年来研究发现的与糖尿病的发生发展密切相关的信号转导通路有AGE-RAGE信号通路、PI 3K-Akt信号通路、VEGF信号通路、MAPK信号通路等。结论益气祛风通络方治疗糖尿病肾脏疾病的机制可能与抑制炎症反应密切相关,并涉及多种炎症相关的信号转导通路,其中包括PI3K/AKT信号通路、P38MAPK信号通路、ERK s信号通路、AGE-RAGE信号通路、VEGF信号通路、JAK/STAT信号通路等。研究三益气祛风通络法治疗糖尿病肾脏疾病的机制研究目的通过细胞实验揭示益气祛风通络方治疗糖尿病肾脏疾病的内在机理。方法选择SPF级Wistar雄性大鼠30只,进行普通饲料喂养1周。将大鼠随机分为6组,空白组、益气祛风通络组、祛风通络组、阻截剂空白组、阻截剂益气祛风通络组、阻截剂祛风通络组,每组5只。末次灌胃前8小时禁食不禁水,在大鼠股动脉进行无菌采血。将系膜细胞分为6组。第1组:细胞+胎牛血清+低糖DEMEM培养液;第2组:细胞+大鼠空白血清+低糖DEMEM培养液;第3组:细胞+大鼠空白血清+高糖DEMEM培养液;第4组:细胞+大鼠空白血清+阻截剂+高糖DEMEM培养液;第5组:细胞+全方含药血清+高糖DEMEM培养液;第6组:细胞+拆方含药血清+高糖DEMEM培养液。采用Western Blo t法检测P38-MAPK、ICAM-1、MCP-1等蛋白表达情况,采用PCR法检测P38-MAPK、ICAM-1、MCP-1、IL-6、IL-1β、TGF-β1、TNF-α 等指标的基因表达情况。结果P38-MAPK的PCR检测结果显示,第2组和第3组有显着性差异,说明在高糖环境下,肾系膜细胞的P38-MAPK信号通路存在过度激活。第3组和第5组,第3组和第6组,第5组和第6组均有显着性差异,说明全方、拆方均能够抑制P38-MAPK信号通路的过度激活,而全方组的抑制作用较拆方组强。P38-MAPK的Western Blot检测结果显示,2组和3组间有显着性差异,说明高糖环境可以导致P38-MAPK蛋白表达增加。MCP-1的Western Blot检测结果显示,第3组和第5组,第3组和第6组,第5组和第6组间均有显着性差异,说明全方、拆方均能够抑制MCP-1蛋白表达,其中全方的抑制作用较拆方强。本研究MCP-1的PCR检测结果显示,第3组与第5组,第3组与第6组均有显着性差异,说明全方、拆方均能抑制MCP-1基因表达。ICAM-1的Western Blot检测结果显示,1组和3组,2组和3组间均有显着性差异,说明高糖环境能够刺激ICAM-1蛋白过度表达。ICAM-1的PCR检测结果显示第3组与第5组,第3组与第6组均有显着性差异,说明全方、拆方均能抑制ICAM-1基因过度表达。IL-1 β、IL-6、TNF-α的PCR检测结果显示第2组与第3组,第3组与第5组,第3组与第6组均有显着性差异,说明高糖环境能够刺激系膜细胞过度分泌IL-1 β、IL-6、TNF-α等炎症因子,而全方、拆方均能够抑制IL-1β、IL-6、TNF-α等炎症因子的过度分泌。TGF-β1的PCR检测结果显示,第3组与第5组,第3组与第6组均有显着性差异,说明全方、拆方均能抑制TGF-β1的过度分泌。结论高糖环境可以激活P38-MAPK信号通路,导致ICAM-1、MCP-1、IL-1 β、IL-6、TNF-α、TGF-β1等炎症相关细胞因子分泌增多。在全方、拆方等药物干预的情况下,全方对于P38-MAPK信号通路以及上述物质的抑制作用较拆方强,说明从风论治的治疗思路能够抑制P38-MAPK信号通路从而减少各种炎症相关细胞因子的过度分泌,而祛风通络的治法与益气活血化瘀的治法联合应用则较单纯的祛风通络治法抑制作用更明显。
郑德华[7]（2020）在《EPO对AGEs诱导的hPDLSCs细胞周期、凋亡及成骨分化能力的影响及机制研究》文中研究说明目的:研究促红细胞生成素（EPO）对糖基化终末产物（AGEs）诱导的牙周膜干细胞（PDLSCs）细胞周期、凋亡、氧化应激损伤、成骨分化能力降低的逆转作用,p38 MAPK和Wnt/β-catenin信号通路的调控作用以及促红细胞生成素对糖尿病牙周炎牙周骨吸收的抑制作用。AGEs对PDLSCs成骨分化中差异基因和富集通路的影响。方法;（1）人牙周膜干细胞的分离培养和成骨成脂分化诱导,检测间充质干细胞表面标志物CD44、CD90和CD105的表达及造血干细胞表面标志物CD34和CD45的表达。（2）检测EPO对AGEs诱导的PDLSCs氧化应激损伤（ROS、MDA、SOD）的逆转作用。（3）使用流式细胞仪检测AGEs干预PDLSCs 24h后对细胞周期和细胞凋亡的作用以及 EPO 的逆转作用,Westemblot 检测 Bax、Bcl-2、Caspase-3、Caspase-9、p21、p53和CyclinDl蛋白的表达。（4）采用 GeneChip HTArray 2.0（Affymetrix,美国）芯片筛选 AGEs 作用下的成骨诱导组与单纯成骨诱导组PDLSCs的差异基因,并通过聚类分析、差异基因功能分析和信号通路分析等分析方法对AGEs造成的牙周膜干细胞成骨分化能力下降进行初步分析。（5）使用 Realtime PCR和 Westernblot 检测 AGEs 诱导及 EPO 干预 7d 和 14dALP、Runx2、Osterix、OCN的表达,茜素红染色和定量分析矿化结节的形成情况,同时检测p38 MAPK信号通路和Wnt/β-catenin信号通路的关键蛋白β-catenin、CyclinD1、p-p38、p-GSK3β、p38 和 GSK3β 的表达。（6）建立糖尿病牙周炎大鼠模型,并在EPO干预后使用苏木素-伊红染色和免疫组化染色检测大鼠牙周组织中RANKL-OPG、iNOS、TNF-β的表达。结果:（1）使用组织块法培养并纯化PDLSCs,成骨成脂诱导成功,CD44、CD90和CD105均呈阳性表达阳性率均在98%以上。CD45及CD34均呈阴性表达（<1%）。（2）经 AGEs 诱导 24h 后,PDLSCs 内 ROS、MDA 升高,SOD 下降,EPO 能够发挥显着的抗氧化剂作用,降低ROS、升高SOD,显着提高细胞对氧自由基的清除能力,并降低细胞内MDA含量。（3）AGEs能够显着增加处于G1/Go期的PDLSCs细胞数,减少处于G2/M期的细胞数,引发G1/G0期阻滞,抑制PDLSCs细胞增殖。50U/ml、100U/ml和200U/ml EPO组同时加入20μg/ml AGEs干预后,PDLSCs的G1/Go期阻滞发生逆转,处于G1/G0期的PDLSCs细胞数明显减少,随着EPO浓度的升高p53蛋白和p21蛋白表达逐渐下降,CyclinD1蛋白的表达逐渐升高,细胞周期趋于正常。AGEs能够通过改变Bax/Bcl-2关键蛋白比率,激发下游的Caspase级联效应诱导PDLSCs凋亡。EPO能够增强PDLSCs中Bcl-2的蛋白表达,以对抗由AGEs诱导的Bax过表达,同时抑制Bax-Bcl-2下游的Caspase级联效应,减弱由AGEs诱导的凋亡启动（Caspase-9）和凋亡效应（Caspase-3）信号达到减少细胞凋亡的作用。（4）我们筛选了 AGEs+成骨诱导与单纯成骨诱导组间的差异基因并通过聚类分析、差异基因功能分析和信号通路分析等分析方法寻找AGEs对PDLSCs生物学行为调控的潜在靶点,为后续我们对EPO逆转AGEs诱导的牙周膜干细胞成骨分化能力下降的研究提供了基础。（5）AGEs能够明显抑制PDLSCs的成骨分化能力,主要表现为Runx2、OCN和Osterix三者的表达水平在成骨诱导14d后明显低于单纯诱导组,茜素红矿化沉积染色也明显低于单纯诱导组。在加入50U/ml EPO后,我们发现EPO能够部分逆转AGEs造成的PDLSCs的成骨分化能力下降,提高Runx2、OCN和Osterix成骨相关蛋白的的表达,增加矿化沉积。AGEs浓度升高（0μg/ml、1Oμg/ml、50μg/ml）p38磷酸化和GSK3β磷酸化受到阻滞,随着EPO浓度的增加,能够明显升高PDLSCs中β-catenin蛋白和CyclinD1蛋白的表达,增加p38磷酸化和GSK3β磷酸化,对PDLSCs的成骨分化能力起到一定的保护作用。（6）与正常对照组大鼠的牙周组织相比,糖尿病牙周炎大鼠牙周组织中OPG蛋白表达量明显下降,染色程度明显减弱,RANKL阳性表达细胞明显增多,RANKL-OPG比例明显升高,iNOS呈明显阳性,NO浓度明显升高,TGF-β1活性受到抑制,破骨细胞活跃,骨吸收明显。EPO干预后,OPG蛋白表达量明显升高,染色程度明显增强,RANKL阳性表达细胞明显减少,染色程度减弱,iNOS表达明显减弱,NO浓度降低,TGF-β1活性升高。结论:（1）EPO能够逆转AGEs诱导的PDLSCs的细胞周期阻滞和凋亡,其主要机制是抑制AGEs诱导的PDLSCs氧化应激损伤及p53活化途径及下游的凋亡启动和凋亡效应蛋白的表达。（2）EPO能够激活Wnt/β-catenin信号通路促进PDLSCs成骨分化,升高PDLSCs中成骨相关因子OCN、Osterix、Runx2表达,并增加钙盐沉积形成矿化结节;EPO能够部分逆转AGEs造成的PDLSCs成骨分化能力下降,其机制主要是EPO同时调控Wnt/β-catenin信号通路和p38-MAPK信号通路。（3）EPO能够部分逆转高糖和牙周炎症引起的牙槽骨吸收,起到一定的骨稳态维持作用和牙周组织保护作用。
王丽娟[8]（2020）在《基于网络药理学方法探讨虎杖防治DKD肾保护作用的机制研究》文中认为背景DKD是糖尿病最主要的微血管并发症之一,也是导致ESRD的首要原因。其发病机制复杂,涉及遗传因素、环境因素,与炎症、氧化应激、RAAS系统的激活、纤维化均相关。目前以RAAS阻滞剂为基础的综合治疗可以改善DKD患者的病情,却并不能完全阻止DKD进展至ESRD。因此,开发安全有效的新药物以预防或延迟DKD的启动和进展至关重要。DKD症状属于祖国医学“消渴”“水肿”“关格”“虚劳”等范畴,目前比较公认的DKD中医病名当属“消渴肾病”,其病因与先天禀赋不足、后天饮食不节、脏腑亏损、劳欲伤肾相关。病机为脾肾亏虚,气阴两虚,久则夹痰湿、浊毒、瘀血,而致病势加重、病程缠绵。可归纳为:虚、瘀、浊,虚是基本条件,瘀为核心病机,浊乃最终结局。中药虎杖是治疗糖尿病的传统中草药,如唐朝甄权所着《药性论》所云:虎杖能治大热烦躁,止渴,利小便,压一切热毒。虎杖,性味微苦微寒,有清热解毒、利胆退黄、止咳化痰、散瘀止痛的功效,契合DKD“瘀”之核心病机。同时中医理论认为,清热解毒类中药往往具有比较明显的抗炎作用。许多研究均已证实DKD与高血糖和肾缺氧引起的氧化应激和炎症相关,并且在DKD的进展中,炎症途径最为核心,是导致肾小球硬化进展的重要因素,促炎细胞因子和趋化因子（IL-1β和MCP-1）、C反应蛋白（CRP）、肿瘤坏死因子-α（TNF-α）水平与DKD的发生和进展相关。虎杖苷是虎杖的主要有效成分,是白藜芦醇的糖苷形式,两者药理作用相类似,但虎杖苷具有更强的稳定性和抗氧化作用。同时,虎杖苷还是根皮苷的结构类似物,被推测可能同样具有SGLT抑制作用。因此,虎杖苷可能具有新颖的作用机制,可能有一定的肾脏保护作用,降糖保肾双获益,有望成为防治DKD的潜在药物。目的1.采用网络药理学方法和思路,探讨虎杖多组分协同治疗DKD的信号通路及作用机制。2.从细胞实验和动物实验两方面,研究虎杖苷对于SGLT1/2、GLUT1/4活性的抑制作用,以及对STZ诱导的糖尿病大鼠血糖调节和肾脏损伤的影响。方法1.网络药理学利用中药系统药理学数据库（TCMSP）检索并筛选虎杖活性及优效化学成分及潜在作用靶点,通过多个疾病数据库检索糖尿病肾脏病相关靶点,并通过Cytoscape软件分别构建“虎杖活性成分-糖尿病肾脏病”靶点网络图,采用ClueGO分析工具,GO、KEGG基因富集分析虎杖治疗糖尿病肾脏病的作用靶点的生物进程、作用通路等。2.细胞实验,观察虎杖苷对HEK293细胞和3T3-L1脂肪细胞的干预作用及相关指标的检测采用稳定表达SGLT1或SGLT2的人类胚胎肾HEK293细胞作为载体,以14C-AMG为底物来评价体外抑制SGLTs的活性,使用顶部计数微孔板闪烁计数器计算每个孔的放射活性和相应的IC50值,评价不同浓度的虎杖苷的干预作用。采用3T3-L1脂肪细胞,有或没有胰岛素的情况下,不同浓度虎杖苷对于2-脱氧-D-葡萄糖摄入量的影响,使用液体闪烁计数器测量放射性信号,计算2-DG抑制百分比,评价不同浓度虎杖苷GLUT1/4的抑制活性。3.2型糖尿病肾脏病大鼠模型的建立,虎杖苷对DKD模型大鼠的干预及相关指标检测高糖高脂饲养大鼠8周以诱导胰岛素抵抗,然后单次腹膜内注射STZ（35mg/kg bwt）建立DKD大鼠模型,连续2次空腹血糖（FBG）>16.7mmol/L,24小时尿蛋白>20mg为建模成功标准。将大鼠随机分组至代谢笼,分为4组:正常对照组（Normal Control）,DKD模型组（STZ）,阳性对照组（根皮苷）和治疗组（虎杖苷）。各组大鼠分别灌服不同剂量的虎杖苷（20-120mg/kg bwt）、根皮苷（120mg/kg bwt）及对照溶剂（0.25%羧甲基纤维素钠溶液）,连续6周。定期检测大鼠饲料和水的摄入量,检测各组大鼠干预前后血糖、HbA1c、尿素氮、肌酐、24h尿糖、24h尿蛋白,ELISA法测定血清IL-1β,TNF-α,MCP-1和CRP的水平,并探讨时效与量效关系。取1/2左侧肾组织,组织切片予H&E染色,光学显微镜下观察其病理结构的形态学改变。结果1.网络药理学通过OB、DL筛选及文献检索补充,获得虎杖15种优效活性成分,并预测了290个潜在作用靶点。通过韦恩分析得到37个治疗糖尿病肾脏病的作用靶点,并进一步筛选出17个关键靶点。利用ClueGO富集分析治疗靶点被富集在糖尿病并发症中的AGE-RAGE信号通路、粘附连接、HIF-1信号通路、胰岛素抵抗、VEGF信号通路等47条显着通路和活性氧代谢过程、小分子代谢过程的正调控、血管系统发育的正调控、活性氧生物合成过程等87个显着生物过程。2.体外细胞实验虎杖苷体外抑制SGLT1、SGLT2活性评估,选取根皮苷作为阳性对照药。研究结果表明,虎杖苷对SGLT1、SGLT2均有明显抑制作用,IC50分别为1968nM和878.5nM,与根皮苷组相比,虎杖苷具有中等程度的SGLT2抑制活性,表明虎杖苷可能是潜在的SGLT1/2双重抑制剂。虎杖苷对GLUT1、GLUT4的表达作用评估,以细胞松弛素B作为对照组。研究结果显示,在存在胰岛素的情况下,1μM虎杖苷仅轻微抑制2-DG的摄取,而10μM、100μM虎杖苷对2-DG摄取分别产生32%、78%的抑制,说明虎杖苷呈剂量依赖性抑制GLUT4的活性;另一方面,在存在胰岛素的情况下,细胞松弛素B对GLUT4的活性抑制显着增加了 96%。但是,如果没有胰岛素,虎杖苷对GLUT1的抑制同样呈剂量依赖性,但是10μM虎杖苷对对2-DG摄取仅产生27%的抑制作用,10μM细胞松弛素B对GLUT1的活性抑制增加到90%。说明虎杖苷可能作为潜在的SGLT1/SGLT2双重抑制剂,对GLUT1和GLUT4具有高选择性。3.在体动物实验本研究时效与量效关系研究显示,虎杖苷显着且剂量依赖性降低糖尿病大鼠的血糖、促进尿液葡萄糖的排泄,虎杖苷在120mg/kg bwt的剂量产生最佳的降血糖作用。长期药理作用研究表明,虎杖苷在整个治疗过程中均显示持续的降血糖作用,可显着降低DKD模型组大鼠的HbA1c。虎杖苷治疗可减轻DKD大鼠尿蛋白、血清肌酐和尿素氮等肾功能指标,改善多尿,多饮和多食等症状。DKD模型组大鼠血清炎症因子IL-1β,TNF-α,MCP-1和CRP水平显着升高,虎杖苷治疗后,可明显降低DKD大鼠上述炎症因子水平。同时,本实验肾脏组织病理学检查结果表明,相对于正常对照组,DKD模型组大鼠的肾小管和肾小球结构明显恶化,伴有大量炎性细胞浸润。但虎杖苷治疗后,肾组织细胞排列规则,肾小球和肾小管结构相对完整,炎性细胞明显减少。结论1.虎杖主要活性成分可调控糖尿病肾脏病发病重要通路中的多个靶点。2.虎杖苷体外对SGLT1/2、GLUT1/4均有明显抑制作用,具有中等程度的SGLT2抑制活性,虎杖苷可能是潜在的SGLT1/2双重抑制剂。3.虎杖苷体内显着且剂量依赖性降低糖尿病大鼠的血糖、促进尿糖排泄,降低HbA1c、尿蛋白、血清肌酐、尿素氮及炎症因子IL-1β,TNF-α,MCP-1和CRP的水平。表明虎杖苷可能是新型的SGLT1/SGLT2双靶点抑制剂,具有一定的肾脏保护作用,其肾保护机制可能通过降糖、抗炎、抗氧化等多种途径。
孙健[9]（2020）在《解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对胰高血糖素样肽1的影响》文中研究表明目的:通过研究解毒通络益肾浓缩丸对实验性2型糖尿病（T2DM）大鼠的糖代谢、脂代谢、肾功、肾脏组织病理改变、胰高血糖素样肽1（GLP-1）血清中的浓度、GLP-1受体（GLP-1R）基因表达量及cAMP/PKA路径相关蛋白表达的影响,初步探讨其保护肾脏的作用机制,验证导师南征教授“毒损肾络”理论的科学性,为中医药治疗糖尿病肾病（DN）提供新思路。方法:1.将60只雄性SPF级SD大鼠适应性喂养1周,随机分组后运用高脂饲料联合STZ腹腔注射诱导实验性糖尿病（DM）大鼠模型,注射72小时后进行取血,测空腹血糖≥16.7mmol/L且<23.2mmol/L者视为造模成功。将造模成功的45只大鼠随机五组,分别为DM模型组9只,解毒通络益肾浓缩丸高、中、低剂量组,阳性对照药（厄贝沙坦片）组各9只。中药治疗组通过灌胃给药,剂量为解毒通络益肾浓缩丸混悬液高剂量3.0g/kg/d、中剂量1.5g/kg/d、低剂量0.75g/kg/d;西药对照组以3.5mg/kg/d剂量厄贝沙坦片混悬液进行灌胃。连续给药12周,期间记录大鼠的体质量、24小时尿量等;检测肾功能、血脂情况,检测空腹血糖、糖化血红蛋白、24h尿微量白蛋白,实验结束时记录肾重/体重。2.运用光学显微镜和透射电镜对肾组织病理形态学改变进行观察,研究解毒通络益肾浓缩丸对糖尿病大鼠肾脏组织结构病理形态学的影响。3.采用ELISA法、免疫组化方法、Westenblot、RT-PCR法检测解毒通络益肾浓缩丸对肾组织血清GLP-1浓度、肾组织中GLP-1R相关蛋白的影响。4.采用ELISA法、免疫组化方法、Westenblot法观察cAMP、8-OHdG、PKA、P47-phox的影响。结果:1.解毒通络益肾浓缩丸能够缓解实验性糖尿病大鼠的精神萎靡、体重减轻、饮食增多以及尿量增加等常见临床症状。2.解毒通络益肾浓缩丸能够改善糖代谢和脂代谢,减低实验性DM大鼠空腹血糖、TC、TG浓度。3.解毒通络益肾浓缩丸对实验性DM大鼠早期蛋白尿有抑制作用,降低Scr、BUN,保护肾功能。4.解毒通络益肾浓缩丸具有改善实验性DM大鼠肾脏组织结构病理损害,具有延缓肾脏组织病理性改变的作用。5.解毒通络益肾浓缩丸能提高实验性DM大鼠血清GLP-1浓度,上调肾脏GLP-1R受体蛋白及基因表达的作用。6.解毒通络益肾浓缩丸能够调节实验性DM大鼠肾组织中cAMP、PKA、8-OHdG、p47-phox含量,激活cAMP/PKA通路,下调尿液中8-OHdG,起到抗氧化应激的作用。结论:解毒通络益肾浓缩丸能够改善实验性DM大鼠的一般状态、改善糖脂代谢、抑制肾组织结构病理性损伤,具有提升血清GLP-1浓度及肾组织中GLP-1R表达的作用,激活cAMP/PKA通路,下调8-OHdG,抑制氧化应激。导师南征教授提出消渴肾病（糖尿病肾病）的病机关键是“毒损肾络,邪伏膜原”。本研究是在这一思想指导下,运用“调散膏、达膜原”及“解毒益肾、通络导邪”的治法与糖尿病肾病的现代医学发病机制相结合,发现解毒通络益肾浓缩丸可能通过调节GLP-1来对肾脏起到直接与间接的保护作用。
郭晓雨[10]（2020）在《槲皮素对糖尿病牙周炎大鼠牙周组织的作用及其血清AGEs水平的影响》文中研究表明目的:通过建立牙周炎大鼠模型、糖尿病大鼠模型和糖尿病牙周炎大鼠模型,并对糖尿病牙周炎大鼠进行槲皮素干预,对比观察各组间牙周组织形态、血糖值、牙槽骨吸收量和血清晚期糖基化终末产物（AGEs）含量的差异,探讨牙周炎与糖尿病之间的相互作用及槲皮素对实验性糖尿病牙周炎大鼠的治疗作用。方法:选取70只雄性SD大鼠,体重130-150g,随机分成6组,空白对照组（C组）10只,剩余60只大鼠随机分为5组,分别是:牙周炎模型组（P组）,糖尿病模型组（D组）,糖尿病牙周炎模型组（DP组）,糖尿病牙周炎非治疗组（DP+N组）,糖尿病牙周炎槲皮素治疗组（DP+Q组）,每组12只。C组不干预正常喂养。D组大鼠适应性喂养一周,采用高糖高脂饲料喂养6周后一次性腹腔注射1%链脲佐菌素,注射计量为50mg/kg,造糖尿病大鼠模型。72小时后测量空腹血糖,连续3次测量血糖值均>16.7mmol/L为造模成功。造模成功后继续高糖高脂喂养。P组、DP组、DP+N组和DP+Q组大鼠适应性喂养一周后,10%水合氯醛麻醉下采用0.2mm正畸结扎丝结扎双侧上颌第一磨牙,结扎后P组大鼠喂食糖水（葡萄糖100g/L）润湿的普通鼠粮,DP组、DP+N组和DP+Q组大鼠喂食糖水润湿的高糖高脂鼠粮,造牙周炎模型。结扎6周后每组中随机挑选1只大鼠确定牙周炎模型是否成功。随后将DP组、DP+N组和DP+Q组大鼠按糖尿病造模方法注射1%链脲佐菌素,形成糖尿病牙周炎并存的模型,继续以湿润的高糖高脂鼠粮喂养。DP+Q组大鼠每天上午10点按150mg/（kg*d）计量对大鼠灌胃槲皮素脂质体。DP+N组灌胃等量的空白脂质体,连续灌胃6周。6周后处死所有大鼠,处死前测量各组大鼠血糖值,并在麻醉下收集股动脉血,处死后取上颌骨。动脉血离心取血清,用ELISA法测AGEs含量;上颌骨置于4%多聚甲醛中固定48小时,沿腭中缝剪开,右侧放入10%EDTA中脱钙6周制作牙周连续切片并进行HE染色,观察牙周组织形态学变化,左侧剥离牙龈用游标卡尺测量牙槽骨吸收量。对各数据进行统计学分析。结果:1.建模结果1.1糖尿病大鼠建模结果糖尿病模型组（D组）大鼠注射链脲佐菌素后逐渐出现多饮多食多尿等症状,毛发晦暗无光泽,行动迟缓,反应迟钝,垫料易脏每日需更换2-3次,并且血糖始终大于16.7mmol/L。证明糖尿病建模成功。1.2牙周炎大鼠建模结果牙周炎模型组（P组）大鼠经结扎丝结扎6周后,上颌双侧第一磨牙牙颈部大量牙石、菌斑和食物残渣,牙龈红肿有深牙周袋,袋深超0.6mm,探诊出血,患牙松动Ⅱ°-Ⅲ°。HE染色显示结合上皮向根方增殖,牙槽骨吸收,牙周炎袋内有大量炎细胞浸润,胶原蛋白水肿变性。证明牙周炎建模成功。1.3糖尿病牙周炎大鼠造模糖尿病牙周炎模型组（DP组）、糖尿病牙周炎非治疗组（DP+N组）、糖尿病牙周炎槲皮素治疗组（DP+Q组）的大鼠符合上述两种结果,证明牙周炎糖尿病模型建立成功。2.造模成功后各组继续喂养6周结果2.1大鼠一般情况C组、P组大鼠代谢正常,体型健硕,毛发有光泽,行动敏捷,垫料干燥一天更换1次即可。DP组、DP+N组、D组大鼠多饮多食多尿等症状加重,体型消瘦,毛发更加晦暗无光泽,行动迟缓,反映迟钝,个别大鼠出现视网膜病变,垫料易脏潮湿有异味,每日需更换2-3次。DP+Q组大鼠多饮多食多尿等症状有所改善,体型较为消瘦,毛发无光泽,行动较为活跃,垫料潮湿有异味,每日需更换2次。2.2组织学观察C组大鼠牙龈上皮完整,结合上皮根方位于釉牙骨质界处,未见附着丧失,结缔组织无明显的炎细胞浸润,牙周膜纤维排列正常,牙龈的胶原纤维无变性,牙槽骨未见明显吸收;P组、DP组和DP+N组大鼠牙龈上皮糜烂,可见向根方增殖的结合上皮,牙龈上皮钉突增生,上皮及固有层下方见大量炎症细胞浸润,牙周膜纤维和胶原纤维水肿变性,且排列紊乱,牙槽骨可见大量骨陷窝,牙槽嵴顶的高度降低明显,其中P组炎症状态较轻;DP+Q组大鼠牙龈上皮较完整,牙周袋内有轻度的炎细胞浸润,牙周膜呈连续状,胶原纤维出现增生,牙槽骨可以观察到大量的成骨细胞及新生骨。2.3血糖值检测结果（±s,mmol/L）C组:3.6±0.16;P组:3.7±0.17;D组:25.3±1.44;DP组:28.9±2.16;DP+N:28.8±2.25;DP+Q组:20.6±1.60。C与P组数据无统计学差异;D组、DP组、DP+N组和DP+Q组的血糖值明显高于C组（P<0.05）;DP组的血糖值高于D组（P<0.05）;DP+N组的血糖值高于DP+Q组（P<0.05）。2.4牙槽骨吸收情况（±s,mm）C组:0.530±0.11;P组:0.986±0.06;D组:0.566±0.10;DP组:1.146±0.20;DP+N组:1.129±0.21;DP+Q组:0.846±0.21。P组、DP组、DP+N组牙槽骨吸收量明显大于C组（P<0.05）;DP组数值大于P组（P<0.05）;DP+N组数值大于DP+Q组（P<0.05）。2.5血清AGEs含量测量结果（±s,ng/L）C组:100.3±9.37;P组:102.3±3.20;D组:115.3±15.80;DP组:128.8±5.90;DP+N组:127.6±3.50;DP+Q组:111.6±4.33。D组、DP组、DP+N组和DP+Q组血清AGEs含量明显高于C组（P<0.05）;P组和C组数值相似（P>0.05）;DP组数值高于D组（P<0.05）;DP+N组数值高于DP+Q组（P<0.05）。结论:1.牙周炎大鼠模型、Ⅱ型糖尿病大鼠模型和糖尿病牙周炎大鼠模型建模成功。2.糖尿病和牙周炎相互影响,糖尿病加重牙周组织炎症,牙周组织炎症造成糖尿病大鼠的血糖值和血清AGEs含量升高。3.槲皮素对Ⅱ型糖尿病牙周炎大鼠的牙周组织具有一定保护作用,并有助于降低血糖值和血清AGEs含量。
二、金雀异黄素对终末糖基化产物刺激大鼠系膜细胞终末糖基化产物受体表达的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、金雀异黄素对终末糖基化产物刺激大鼠系膜细胞终末糖基化产物受体表达的影响（论文提纲范文）
（1）中医药干预AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病的机制研究概述（论文提纲范文）
| 1 抑制AGEs形成，减少AGEs-RAGE轴的激活 |
| 1.1 降低TGF-β1表达，延缓肾纤维化 |
| 1.2 保护肾小球滤过膜 |
| 2 抑制RAGE表达，减轻AGEs-RAGE轴及其下游信号通路对肾脏的损伤 |
| 3 阻断氧化应激与AGEs-RAGE轴之间的的反馈通路 |
| 4 抑制AGEs-RAGE信号通路激活的炎症通道 |
| 5 改善AGEs-RAGE途径介导的内皮细胞损伤 |
| 6 总结 |
（2）血清AGEs及其受体Gal-3与2型糖尿病肾脏病的相关性研究（论文提纲范文）
| 缩略词表 |
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 创新点与局限性 |
| 参考文献 |
| 糖基化终末产物及其受体在2型糖尿病肾脏病中的研究进展 |
| 参考文献 |
| 攻读学位期间获得的学术成果 |
| 致谢 |
（3）基于AGEs/RAGE通路的黄连解毒汤干预糖尿病肾病作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| abstract |
| 第一章 前言 |
| 1.1 糖尿病肾病研究进展 |
| 1.2 AGEs/RAGE通路与糖尿病肾病 |
| 1.2.1 AGEs及 RAGE受体概述 |
| 1.2.2 AGEs/RAGE通路在糖尿病肾病中的作用 |
| 1.2.3 AGEs/RAGE通路的药物研究概述 |
| 1.3 黄连解毒汤药理作用研究概述 |
| 1.3.1 调脂降糖作用 |
| 1.3.2 抗炎作用 |
| 1.3.3 抗氧化作用 |
| 1.4 研究意义、研究内容和技术路线 |
| 第二章 黄连解毒汤干预糖尿病肾病的药效学评价 |
| 2.1 实验材料 |
| 2.1.1 仪器 |
| 2.1.2 药品与试剂 |
| 2.1.3 动物 |
| 2.2 实验方法 |
| 2.2.1 黄连解毒汤的制备 |
| 2.2.2 实验分组与给药 |
| 2.2.3 生化指标检测 |
| 2.2.4 肾组织病理学 |
| 2.2.5 免疫组化法 |
| 2.2.6 统计方法 |
| 2.3 实验结果 |
| 2.3.1 黄连解毒汤对db/db小鼠体重的影响 |
| 2.3.2 黄连解毒汤对db/db小鼠血糖的影响 |
| 2.3.3 黄连解毒汤对db/db小鼠血脂的影响 |
| 2.3.4 黄连解毒汤对db/db小鼠肾功能的影响 |
| 2.3.5 黄连解毒汤对db/db小鼠肾组织病理学分析 |
| 2.3.6 黄连解毒汤对db/db小鼠肾组织Nephrin、TGF-β1 表达的影响 |
| 2.4 讨论与小结 |
| 第三章 黄连解毒汤干预糖尿病肾病的网络药理学研究 |
| 3.1 实验材料 |
| 3.2 实验方法 |
| 3.2.1 黄连解毒汤入血成分收集 |
| 3.2.2 靶点预测及关联网络构建 |
| 3.2.3 蛋白互作网络图的构建 |
| 3.2.4 GO和 KEGG富集分析 |
| 3.3 实验结果 |
| 3.3.1 成分-疾病-靶点网络图 |
| 3.3.2 蛋白互作网络分析 |
| 3.3.3 GO功能分析 |
| 3.3.4 KEGG通路分析 |
| 3.4 讨论与小结 |
| 第四章 基于AGEs/RAGE通路的黄连解毒汤干预糖尿病肾病的作用机制研究 |
| 4.1 实验材料 |
| 4.1.1 仪器 |
| 4.1.2 试剂 |
| 4.1.3 动物 |
| 4.2 实验方法 |
| 4.2.1 实验分组与给药 |
| 4.2.2 SOD、GSH及 MDA检测 |
| 4.2.3 AGEs含量检测 |
| 4.2.4 免疫荧光法 |
| 4.2.5 Western blot法 |
| 4.2.6 统计方法 |
| 4.3 实验结果 |
| 4.3.1 黄连解毒汤对肾组织SOD、GSH和 MDA含量的影响 |
| 4.3.2 黄连解毒汤对血浆和肾组织中AGEs含量的影响 |
| 4.3.3 黄连解毒汤对肾组织GLO1、RAGE蛋白表达的影响 |
| 4.3.4 黄连解毒汤对肾组织AKT、p-AKT、Nrf2、HO-1和SOD2 蛋白表达的影响 |
| 4.4 讨论与小结 |
| 第五章 黄连解毒汤干预糖尿病肾病的尿液代谢组学研究 |
| 5.1 实验材料 |
| 5.1.1 仪器与试剂 |
| 5.1.2 动物 |
| 5.2 实验方法 |
| 5.2.1 实验分组及给药 |
| 5.2.2 尿液样品的制备 |
| 5.2.3 色谱条件 |
| 5.2.4 方法学考察 |
| 5.2.5 数据处理及分析 |
| 5.3 实验结果 |
| 5.3.1 方法学验证 |
| 5.3.2 主成分分析 |
| 5.3.3 正交偏最小二乘判别分析 |
| 5.3.4 潜在生物标志物的筛选与鉴定 |
| 5.3.5 代谢通路预测 |
| 5.3.6 生化指标与生物标志物相关性分析 |
| 5.4 讨论与小结 |
| 第六章 结论与展望 |
| 6.1 研究小结 |
| 6.2 研究展望 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
（4）基于轴探讨糖尿病肾病中医发病机制及治疗靶点（论文提纲范文）
| 1 糖尿病肾病中医发病机制 |
| 2 AGEs-RAGE轴的伏邪特性 |
| 2.1 AGEs |
| 2.2 RAGE |
| 2.3 AGEs-RAGE轴 |
| 3 基于AGEs-RAGE轴中医治疗 |
| 3.1 AGEs生成抑制剂 |
| 3.2 AGEs交联破坏剂 |
| 3.3 AGEs-RAGE通路阻断剂 |
| 3.4 抗氧化阻断AGEs-RAGE轴正反馈环路 |
| 4 小结 |
（5）参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠晚期糖基化终末产物的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| ABSTRACT |
| 中英文缩略词表 |
| 1.引言 |
| 2.实验研究 |
| 2.1 研究技术路线图 |
| 2.2 实验动物 |
| 2.3 实验饲料 |
| 2.4 实验环境 |
| 2.5 实验药品 |
| 2.6 实验仪器、耗材及试剂(见下表1,2) |
| 3.实验方法 |
| 3.1 分组及造模方法 |
| 3.2 给药方法 |
| 3.3 标本采集与处理 |
| 3.4 观察项目及检测方法 |
| (1)一般情况 |
| (2)空腹血糖检测 |
| (3)血脂检测 |
| (4)胸主动脉病理形态学观察 |
| (5)免疫组化检测胸主动脉组织PAI-1蛋白表达 |
| (6)血清OX-LDL水平检测 |
| (7)血清MDA水平检测 |
| (8)血清SOD活力检测 |
| (9)血清AGEs含量测定 |
| 3.5 统计学方法 |
| 4.实验结果与分析 |
| 4.1 实验大鼠的一般情况 |
| 4.2 实验大鼠空腹血糖 |
| 4.3 实验大鼠血脂水平 |
| 4.4 实验大鼠血清OX-LDL水平 |
| 4.5 实验大鼠胸主动脉组织PAI-1蛋白含量 |
| 4.6 实验大鼠血清MDA水平 |
| 4.7 实验大鼠血清SOD水平 |
| 4.8 实验大鼠血清AGEs水平 |
| 4.9 实验大鼠胸主动脉HE染色观察 |
| 4.10 小结 |
| 5.讨论 |
| 5.1 现代医学对糖尿病大血管病变的认识 |
| 5.1.1 糖尿病大血管病变的病理因素 |
| 5.1.2 糖尿病大血管病变的主要病理变化 |
| 5.1.3 代谢记忆与糖尿病大血管病变的发生密切相关 |
| 5.1.4 AGEs与糖尿病大血管病变 |
| 5.1.5 AGEs与氧化应激的关系 |
| 5.1.6 氧化应激的概念 |
| 5.1.7 氧化应激水平的测定 |
| 5.1.8 氧化应激与糖尿病大血管病变的关系 |
| 5.2 传统医学对糖尿病大血管病变的认知 |
| 5.2.1 伏邪是糖尿病大血管病变形成的核心病机 |
| 5.2.2 伏邪理论的溯源 |
| 5.2.3 正虚络空、脏腑不调为伏邪产生之本 |
| 5.2.4 .痰瘀内结为病情深化的重要潜在病理因素 |
| 5.2.5 脉络受损是血管病变的中心环节 |
| 5.2.6 “脉搏坚病”是伏邪引发的直接恶果 |
| 5.2.7 伏邪与AGEs的关系 |
| 5.3 药物选择 |
| 5.3.1 参芪复方药物分析及方解 |
| 5.3.2 参芪复方改善糖尿病大血管病变的前期机制研究 |
| 5.3.3 阳性对照药物的选择 |
| 5.4 糖尿病大鼠大血管病变模型的建立 |
| 5.4.1 实验性糖尿病大鼠大血管病变模型的诊断标准 |
| 5.4.2 本实验光镜结果 |
| 5.4.3 本实验动物模型的评价 |
| 5.5 参芪复方对糖尿病大血管病变治疗的分析探讨 |
| 5.5.1 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠一般情况的影响 |
| 5.5.2 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠空腹血糖的影响 |
| 5.5.3 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠血脂的影响 |
| 5.5.4 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠血清OX-LDL水平的影响 |
| 5.5.5 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠胸主动脉PAI-1蛋白含量的影响 |
| 5.5.6 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠血清MDA水平的影响 |
| 5.5.7 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠血清SOD水平的影响 |
| 5.5.8 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠血清AGEs水平的影响 |
| 5.5.9 参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠胸主动脉病理形态学的影响 |
| 5.5.10 推测参芪复方可以益气健脾、养阴生津之功效促进抗氧化物歧化酶的生成;以活血化瘀、祛邪通络之功效促进氧化产物和晚期糖基化终末产物的排出 |
| 结论 |
| 问题与展望 |
| 参考文献 |
| 综述 晚期糖基化终末产物引发血管损伤的机制探析 |
| 参考文献 |
| 在读期间公开发表的学术论文 |
（6）基于肾络伏风病机的糖尿病肾脏疾病从风论治治法及其作用机制研究（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 符号说明 |
| 文献综述 |
| 综述一 糖尿病肾脏疾病的中医病机及治法研究进展 |
| 参考文献 |
| 综述二 “风药”的内涵及古今应用 |
| 参考文献 |
| 综述三 糖尿病肾脏疾病系膜细胞免疫炎症损伤及其中医药干预研究进展 |
| 参考文献 |
| 前言 |
| 研究一 基于数据挖掘的糖尿病肾脏疾病从风论治治法研究 |
| 资料与方法 |
| 研究结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 研究二 基于网络药理学的益气祛风通络法治疗糖尿病肾脏疾病作用机制研究 |
| 1 研究方法 |
| 2 研究结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 研究三 益气祛风通络法治疗糖尿病肾脏疾病的机制研究 |
| 材料与方法 |
| 指标测量 |
| 实验结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 结语 |
| 附录1 世界中医药学会联合会糖尿病专业委员会糖尿病及其并发症本虚标实证候诊断标准 |
| 附录2 |
| 附录3 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（7）EPO对AGEs诱导的hPDLSCs细胞周期、凋亡及成骨分化能力的影响及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 符号说明 |
| 前言 |
| 第一部分 人牙周膜干细胞的体外培养和鉴定 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 参考文献 |
| 第二部分 EPO对AGEs诱导PDLSCs细胞周期和凋亡的影响及作用机制 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三部分 AGEs调控PDLSCs成骨分化中差异基因的表达及富集通路的分析 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四部分 AGEs诱导PDLSCs成骨分化能力下降和EPO的拮抗作用及机制研究 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第五部分 EPO对糖尿病牙周炎大鼠牙槽骨吸收的影响 |
| 前言 |
| 材料和方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 全文总结 |
| 致谢 |
| 攻读博士期间发表的学术论文目录 |
| 附件 |
| 学位论文评阅及答辩情况表 |
（8）基于网络药理学方法探讨虎杖防治DKD肾保护作用的机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 主要缩略词 |
| 第一部分 前言 |
| 第二部分 文献研究 |
| 一、中医对糖尿病肾脏病的认识 |
| 1. 对DKD中医病名的认识 |
| 2. 对DKD病因病机的认识 |
| 3. 中医药治疗DKD的现状和进展 |
| 二、中药虎杖及其提取物虎杖苷发挥肾保护作用机制研究进展 |
| 1. DKD的定义及流行病学研究 |
| 2. DKD治疗中的困境和争议 |
| 3. DKD治疗中现有药物的综合探索及未来方向 |
| 4. 虎杖及其提取物虎杖苷概述 |
| 5. 虎杖及其提取物虎杖苷发挥肾脏保护效应的机制研究 |
| 第三部分 基于网络药理学的虎杖防治DKD活性成分靶点探究 |
| 一、概述 |
| 二、资料与方法 |
| 1. 虎杖所含主要化学成分的收集和筛选 |
| 2. 化学成分潜在靶点收集 |
| 3. 糖尿病肾脏病疾病靶点预测 |
| 4. 虎杖化学成分作用靶点与糖尿病肾脏病靶点集韦恩分析 |
| 5. 生物分子网络建立及富集分析 |
| 三、结果 |
| 1. 虎杖中候选化学活性成分的收集和筛选 |
| 2. 化学成分潜在靶点收集 |
| 3. 糖尿病肾脏病相关靶点的搜集 |
| 4. 虎杖活性成分作用靶点与糖尿病肾脏病疾病靶点交集 |
| 5. 生物分子网络建立及富集分析 |
| 四、讨论 |
| 五、结语 |
| 第四部分 虎杖苷对于SGLT1/2、GLUT1/4活性的影响 |
| 一、仪器设备及耗材 |
| 二、实验方法 |
| 1. 细胞培养 |
| 2. 细胞分组 |
| 3. SGLT1和SGLT2体外抑制活性评估 |
| 4. 3T3-L1脂肪细胞2-脱氧-D-葡萄糖摄入量的评估 |
| 5. 统计学处理 |
| 三、实验结果 |
| 1. 虎杖苷对SGLT1和SGLT2的抑制活性 |
| 2. 虎杖苷对GLUT1和GLUT4的表达影响 |
| 四、小结 |
| 五、讨论 |
| 第五部分 虎杖苷对糖尿病大鼠血糖调节和肾脏损伤的影响 |
| 一、实验材料 |
| 1. 仪器设备及耗材 |
| 2. 药物及试剂 |
| 3. 抗体及试剂盒 |
| 二、实验方法 |
| 1. 糖尿病肾脏病动物模型的建立 |
| 2. 实验动物分组 |
| 3. 虎杖苷、根皮苷给药量 |
| 4. 大鼠一般情况观察及指标检测 |
| 5. 肾组织学观察 |
| 6. 统计学处理 |
| 三、实验结果 |
| 1. 一般情况观察 |
| 2. 虎杖苷对糖尿病大鼠血糖水平及24h尿糖的影响 |
| 3. 虎杖苷对血糖、HbA1c、24h尿糖、饲料及饮水摄入量的影响 |
| 4. 虎杖苷对炎症反应的影响 |
| 5. 虎杖苷对STZ诱导的糖尿病大鼠肾脏组织及肾功能的影响 |
| 四、小结 |
| 五、讨论 |
| 参考文献 |
| 全文结论 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
| 博士期间发表论文 |
| 承担课题 |
| 综述一 |
| 参考文献 |
| 综述二 |
| 参考文献 |
（9）解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对胰高血糖素样肽1的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语 |
| 引言 |
| 文献综述 |
| 第一章 中医古今文献对糖尿病肾病的认识 |
| 第二章 现代医学对糖尿病肾病的认识 |
| 实验研究 |
| 第一章 解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第二章 解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠肾脏病理形态学的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第三章 解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠GLP-1 表达的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第四章 解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠肾脏cAMP/PKA信号通路的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 4 讨论 |
| 5 小结 |
| 第五章 讨论 |
| 结论 |
| 本文创新点 |
| 参考文献 |
| 附图 |
| 致谢 |
| 在学期间科研成果 |
| 个人简历 |
（10）槲皮素对糖尿病牙周炎大鼠牙周组织的作用及其血清AGEs水平的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 英文缩写 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述 AGEs对牙周组织的影响 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
四、金雀异黄素对终末糖基化产物刺激大鼠系膜细胞终末糖基化产物受体表达的影响（论文参考文献）
- [1]中医药干预AGEs-RAGE信号通路改善糖尿病肾病的机制研究概述[J]. 姜婷,滕士超,安晓飞,易丽. 环球中医药, 2022(01)
- [2]血清AGEs及其受体Gal-3与2型糖尿病肾脏病的相关性研究[D]. 孙紫娟. 昆明医科大学, 2021(01)
- [3]基于AGEs/RAGE通路的黄连解毒汤干预糖尿病肾病作用机制研究[D]. 何文娇. 广东药科大学, 2021(02)
- [4]基于轴探讨糖尿病肾病中医发病机制及治疗靶点[J]. 张宗金,王悦芬,赵文景,崔方强,孟元,沈存,孙雪艳,王梦迪,刘梦超. 世界中医药, 2020(23)
- [5]参芪复方对糖尿病大血管病变模型大鼠晚期糖基化终末产物的影响[D]. 成林. 成都中医药大学, 2020(02)
- [6]基于肾络伏风病机的糖尿病肾脏疾病从风论治治法及其作用机制研究[D]. 南赫. 北京中医药大学, 2020(04)
- [7]EPO对AGEs诱导的hPDLSCs细胞周期、凋亡及成骨分化能力的影响及机制研究[D]. 郑德华. 山东大学, 2020(09)
- [8]基于网络药理学方法探讨虎杖防治DKD肾保护作用的机制研究[D]. 王丽娟. 南京中医药大学, 2020(01)
- [9]解毒通络益肾浓缩丸对实验性糖尿病大鼠肾脏的保护作用及对胰高血糖素样肽1的影响[D]. 孙健. 长春中医药大学, 2020(08)
- [10]槲皮素对糖尿病牙周炎大鼠牙周组织的作用及其血清AGEs水平的影响[D]. 郭晓雨. 河北医科大学, 2020(02)