一、地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响（论文文献综述）
徐新[1]（2019）在《VWF-A2对创伤性脑损伤神经保护作用及机制研究》文中研究指明背景和目的:创伤性脑损伤（Traumatic brian injury,TBI）是威胁人类生命的重大疾病,具有高致残、致死特点,目前尚缺乏有效的药物干预手段。TBI病理生理机制复杂,继发的凝血功能障碍（TBI associated coagulopathy,TBI-AC）及血脑屏障破坏被认为与其不良预后相关。前期研究发现,TBI急性期粘附配体血管性血友病因子（von Willibrand factor,VWF）水平升高且粘附活性增强,通过与脑源性微囊泡（brain-derived microvesicles,BDMVs）结合,协助BDMVs破坏血脑屏障及引起TBI-AC。有研究证明纯化的VWF-A2片段可抑制血小板与VWF以及血小板与纤维蛋白的相互作用。本研究拟通过重组质粒转染、表达、纯化获得高纯度重组VWF-A2蛋白,腹腔注射干预TBI小鼠。探索VWF-A2对TBI小鼠血脑屏障及凝血系统的影响,同时探索其可能的作用机制,为TBI患者药物治疗提供新思路。方法:（1）通过重组质粒转染、表达、纯化获得重组VWF-A2蛋白（组氨酸标签标记）。通过凝胶电泳、蛋白质印迹法及金属酶ADAMTS-13体外酶切实验对VWF-A2进行鉴定和初步功能性研究。（2）通过液压打击仪制备C57BL/6J小鼠重型TBI模型,伤后30 min腹腔注射VWF-A2（4 mg/kg）,检测不同时间点VWF-A2循环血浓度。评估VWF-A2对TBI小鼠伤后3天内死亡率的影响,改良版神经功能评分评估神经功能预后。（3）伊文氏蓝渗漏实验检测TBI小鼠血脑屏障通透性。苏木精-伊红染色评估TBI小鼠肺组织血管渗出情况。流式细胞术检测循环血MVs水平。Transwell小室系统和免疫荧光染色技术检测VWF-A2对TBI小鼠外周血源性MVs及体外冻融匀浆法制备的BDMVs介导的内皮屏障破坏的影响。（4）酶联免疫吸附试验检测TBI小鼠循环血VWF抗原、D-二聚体和纤维蛋白原含量及VWF结合胶原能力。磷钨酸-苏木精染色评估TBI小鼠肾脏纤维素沉积情况。凝血酶生成实验和活化凝血因子X凝血时间检测MVs介导的凝血反应。流式细胞仪和血细胞计数仪检测血小板激活水平及血小板计数。小鼠断尾流血时间检测TBI小鼠出血倾向。（5）免疫共沉淀法及表面等离子体共振技术检测TBI小鼠循环血及体外VWF与VWF-A2相互作用。同时评估VWF-A2对瑞斯托霉素辅因子活性和剪切力诱导的血小板聚集的影响。结果:通过VWF-A2重组质粒转染、表达、纯化成功获得大量高纯度重组VWF-A2蛋白（纯度90-95%）,金属酶ADAMTS-13可有效酶切VWF-A2,证明了其具有生物学活性。VWF-A2可减少TBI后循环血中携带VWF的脑源性、血小板源性及内皮细胞源性MVs释放,抑制VWF协助下BDMVs介导的血脑屏障破坏及内皮细胞激活,同时降低了TBI小鼠死亡率,改善存活小鼠神经功能预后。同时,VWF-A2可减少TBI后高活性VWF的释放并能抑制其粘附活性,减轻VWF引起的血小板激活及血小板减少症。此外,VWF-A2对凝血及纤溶级联反应也有抑制作用,表现为减轻了MVs介导的凝血酶生成及活化凝血因子Xa凝血反应,D-dimer水平下降,纤维蛋白原水平上升,并且缓解了TBI后出血倾向但不引起正常老鼠出血倾向。最后,通过体内、体外实验证实VWF-A2可结合到活化VWF暴露的A1结构域,抑制其活性,表现为减轻瑞斯托霉素或剪切力诱导的血小板聚集。结论:本研究成功纯化重组VWF-A2蛋白,证明VWF-A2可减轻TBI小鼠血脑屏障及凝血系统损害,降低死亡率,改善神经功能预后。其神经保护机制可能是结合并抑制了TBI后释放的高活性VWF功能,提示了其作为药物开发的可行性,为TBI药物治疗提供新思路。同时,VWF-A2还可能成为特异性检测高活性VWF的新手段,用于诊断血栓性血小板减少性紫癜、严重感染等疾病。
常鑫淼[2]（2019）在《西格列汀通过抑制自噬过程改善高糖造成的血管内皮损伤》文中研究说明目的:糖尿病大血管并发症是糖尿病患者致残、致死的主要原因,高糖引起的血管内皮功能损伤是大血管并发症的始动因素和病理生理学基础。西格列汀（sitagliptin）是一种二肽基肽酶-4 抑制剂（Dipeptidyl peptidase-4 inhibitor,DPP-4 inhibitor）,近年来作为一种口服降糖药应用于临床。既往研究显示西格列汀除了具有降低血糖的作用,还可通过保护血管内皮细胞功能延缓动脉粥样硬化的发生,但作用机制不明确。自噬是近些年的研究热点之一,在糖尿病及其并发症的发生发展中发挥重要作用,但自噬在糖尿病大血管并发症发生发展中的作用及作用机制不明。本研究以糖尿病大鼠和高糖培养的人脐静脉内皮细胞为研究对象,观察西格列汀对血管内皮细胞的作用,并探讨自噬在其中发挥的作用,旨在为糖尿病大血管病变的发生机制和干预策略提供一定的理论支持。方法:随机选取8只5周龄SD大鼠标准饲料喂养,作为正常对照组。选取42只5周龄SD大鼠,高脂饲料喂养4周后予链脲佐菌素30mg/kg腹腔注射,1周后测随机血糖,连续两次随机血糖≥16.7mmol/l即为2型糖尿病造模成功。将造模成功的大鼠随机分为糖尿病组和西格列汀干预组。西格列汀干预组给予西格列汀 10mg/kg/d灌胃,另外两组予等量生理盐水,共干预12周,干预期间监测血糖和体重。实验结束后下腔静脉取血,检测血糖、血脂、VCAM-1水平;留取主动脉标本,H&E染色后观察主动脉形态学变化,TUNEL法检测主动脉内皮细胞凋亡,免疫组化和western blot法检测主动脉组织自噬相关蛋白LC3Ⅱ的表达,western blot法检测主动脉组织JNK、Bcl-2、Beclin-1蛋白表达。体外试验:高糖培养人脐静脉内皮细胞,并用不同浓度西格列汀进行干预,MTT法检测细胞活性,流式细胞学方法检测凋亡,免疫荧光和western blot法检测LC3Ⅱ蛋白表达。选择合适的西格列汀干预浓度,并予雷帕霉素激活自噬,观察细胞活性变化,并检测LC3Ⅱ、Bcl-2、Beclin-1蛋白表达。两组均数比较采用t检验,多组均数比较采用one-way ANOVA检验。结果:体内试验显示西格列汀干预可明显改善糖尿病大鼠的血管内皮损伤。糖尿病大鼠主动脉组织自噬水平增强,西格列汀干预后自噬水平明显下降,同时JNK-Bcl-2-Beclin-1通路蛋白表达水平改变。体外试验显示高糖培养的人脐静脉内皮细胞活性下降,凋亡增加,自噬增强。西格列汀干预可浓度依赖性的改善高糖培养人脐静脉内皮细胞的活性,减少其凋亡,并抑制内皮细胞自噬。予雷帕霉素激活自噬后,西格列汀对高糖培养人脐静脉内皮细胞的保护作用消失。高糖培养下,内皮细胞Bcl-2表达下降,Becin-1表达增加,西格列汀干预后内皮细胞Bcl-2表达升高、Beclin-1表达下降。结论:高糖可引起血管内皮细胞自噬过度激活,西格列汀可通过抑制内皮细胞自噬减轻高糖对血管内皮细胞的损伤。西格列汀可能通过JNK-Bcl-2-Beclin-1通路同时调节自噬和凋亡,发挥对内皮细胞的保护作用。
张玉婷[3]（2016）在《香芪汤对内毒素血症小鼠凝血因子的影响》文中认为目前在兽医临床上,以大肠杆菌、沙门氏菌等革兰氏阴性杆菌为病原的家畜传染病占有相当大的比例。革兰氏阴性杆菌释放的内毒素可以进入血液循环,形成内毒素血症,进而诱发动物机体出现内毒素性休克、炎症反应综合征（systemic inflammatory response syndrome,SIS）、弥漫性血管内凝血（disseminated intravascular coagulation, DIC）等病理变化,可以影响家畜生长性能,进而影响家畜的经济价值。炎症反应与凝血/抗凝血反应息息相关,炎症可促发凝血反应;凝血反应可加重炎症反应；抗凝血反应也可拈抗炎症反应。香芪汤由香附（Rhizoma Cyperi）、黄芪（Astragalus membranaceus）、穿心莲（Andrographis paniculata）以4：3：3为比例组成的中药复方。前期研究表明其能减少大肠杆菌病鸡血清中TNF-α、sEPCR的表达,显示该方剂具有抗炎和抗凝血的功效。本研究以内毒素血症小鼠为模型,进一步研究香芪汤及其单味中药香附、黄芪、穿心莲对内毒素血症小鼠凝血因子表达的影响。主要研究方法、结果如下：1、建立内毒素血症小鼠模型：将无菌生理盐水按0.1 ml/10g体重腹腔注射给空白组小鼠；将LPS （0.25mg/ml）、LPS （0.5mg/ml）、LPS （1.0mg/ml）按0.1 m1/10g体重分别腹腔注射给低剂量组、中剂量组、高剂量组小鼠。发现各模型组小鼠在注射后1h均出现蜷缩、扎堆、闭目等现状,体温下降,眼周红、眼角湿润,粪便稀溏等症状。随着LPS浓度的增加,粪便不成形程度、皮毛松散程度增加,24 h后低剂量、中剂量小鼠恢复正常,36h后高剂量组小鼠恢复正常。各模型组小鼠IL-6、ICAM-1、 VCAM-1的表达量升高,EPCR的表达量显着减少。LPS浓度越高,EPCR的表达量越少。通过比较IL-6、ICAM-1、VCAM-1、EPCR的表达,确定内毒素血症小鼠模型所需LPS溶液的浓度为0.5 mg/ml。2、香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠精神状态的观察：将无菌蒸馏水按0.1mm1/10g体重灌服给空白组、内毒素模型组,1次/d,连用7 d。将香附（0.1 g/m1）、黄芪（0.075 g/m1）、穿心莲（0.075 g/m1）、香芪汤（0.25 g/m1）按0.1 m1/10g体重分别灌服给香附组、黄芪组、穿心莲组、香芪汤组,1次/d,连用7 d。将无菌蒸馏水按0.1 mml/log体重灌服给地塞米松组,连用4 d,第5 d,换用醋酸地塞米松溶液（0.2mg/ml）灌服,连用3 d。第8 d,按0.1 ml/10g体重给空白组腹腔注射无菌生理盐水,其余各组按0.1 ml/10g体重均注射0.5 mg/ml LPS溶液。发现内毒素模型组小鼠在注射LPS1h后出现蜷缩、扎堆、闭目等现状,体温下降,眼周红、湿润,粪便稀溏等情况,24 h后恢复正常。用药各组小鼠在注射LPS溶液12h内出现蜷缩、扎堆,粪便湿润但有形等情况,12h后恢复正常。香附、黄芪、穿心莲及香芪汤能使内毒素血症小鼠体温在正常范围内。3、香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠凝血因子影响的研究：Western Blot法检测可知,内毒素血症小鼠sAPP、TF、sEPCR的表达量明显升高,tPA的表达量明显降低。用香附、黄芪、穿心莲及香芪汤进行干预,均能不同程度降低sAPP、TF、 sEPCR的表达,不降低tPA的表达,起到保护血管内皮、保护PC抗凝途径、保护纤溶系统的作用。4、香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠作用机理的初探：Western Blot法检测可知,内毒素血症小鼠AD AM17、MAPKs、PKC delta的表达量显着升高。用香附、黄芪、穿心莲及香芪汤进行干预,均能不同程度降低AD AM17、MAPKs、PKC delta的表达。结果表明,香芪汤及其单味中药能减少血管上MAPKs、PKC delta的表达,使ADAM17的活化受到抑制,进而使EPCR的脱落减少,起到保护血管内皮、增强机体抗凝的作用。
张亚玲[4]（2012）在《重组蛋白C的靶向设计及其对内皮细胞的保护作用研究》文中进行了进一步梳理目的：探讨糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清对脐静脉内皮细胞（HUVEC）活性和形态的影响，体外构建含有内皮细胞特异性启动子及蛋白C（PC）基因序列的重组腺病毒（Ad-FLT-1/PC）并转染血管内皮细胞，观察PC在内皮细胞中的特异性表达及其对血管内皮细胞的保护作用，进一步揭示糖尿病肾病条件下血管内皮细胞损伤的机制，为糖尿病肾病动脉粥样硬化的防治探索新策略。方法：1体外培养HUVEC,分为对照组与血清干预组，分别予以10%胎牛血清与5%、10%、20%、30%、40%浓度的糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清进行干预，采用四甲基偶氮唑蓝（MTT）法于全自动酶标仪波长492nm处测定各组的吸光光度值（OD值），并于显微镜下观察各组细胞的形态学变化，以分析糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清对HUVEC活性和形态的影响。2重组腺病毒Ad-FLT-1/PC的构建、包装与鉴定。取HUVEC与主动脉平滑肌细胞（HA-vsmc）分别转染Ad-FLT-1/PC、AD-GFP，进行westenBlot检测。3取传代后对数生长期的HUVEC分组：对照组；空病毒组（AD组）（Ad-GFP转染+凝血酶）；PC组（Ad-FLT-1/PC转染）；PC活化组（Ad-FLT-1/PC转染+凝血酶）；均于20%糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清培养基培养，流式细胞仪检测各组的凋亡率。4采用ELISA法测定各组细胞培养上清液中的APC、sEPCR、sTM、VCAM-1、IL-1β的含量，以研究PC经凝血酶活化后对HUVEC功能的影响。结果：1随着糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清浓度的不断增加，细胞OD值不断降低；与对照组OD值（0.40±0.07）相比较,5%血清组OD值（0.74±0.13）与10%血清组OD值（0.46±0.08）较对照组高（P<0.05）；20%血清组OD值（0.31±0.10）、30%血清组OD值（0.21±0.04）及40%血清组OD值（0.20±0.11）较对照组低（P<0.05）；显微镜下观察可见血清干预组较对照组细胞间隙增宽，细胞呈现多角形或者出现丝状突起，细胞浆内可见暗色颗粒，细胞碎片较多，且细胞损害程度随血清浓度升高而增加。2成功构建重组质粒pAdeasy-FIT-1/PC，经转染、包装后获得Ad-FLT-1/PC病毒。扩增纯化后滴度测定结果为3.2×106pfu/ml。转染最佳时间为48h。病毒PCR反应扩增出1386bp的基因片段，Westen blot结果显示，Ad-FLT-1/PC病毒转染HUVEC细胞后PC表达量增加，而转染主动脉平滑肌细胞（HA-vsmc）后无PC表达。3流式细胞仪检测PC活化组的早期凋亡率为（1.53±0.39）%，明显低于对照组（5.16±3.53）%（P<0.05），较AD组（3.82±3.31）%和PC组（2.49±1.16）%低（P>0.05）。4 PC活化组的APC表达量（82.172±4.361）比PC组（53.776±1.515）、AD组（72.079±5.512）高（P<0.05），较对照组表达量（77.411±7.609）高，但差异无统计学意义（P>0.05）。PC活化组的EPCR表达量（6.127±1.130）较其他三组都低，与对照组（7.569±1.515）比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与AD组（6.630±1.067）和PC组（6.530±0.755）无统计学意义（P>0.05）。PC活化组的sTM表达量（0.384±0.150）较对照组（0.405±0.071）、AD组（0.407±0.066）及PC组（0.377±0.155）低（P>0.05）。PC活化组的VCAM-1水平（4.205±0.710）最低，与对照组（5.417±1.180）比较有统计学意义（P<0.05）；与AD组（4.660±0.770）、PC组（4.559±0.565）差异均无统计学意义（P>0.05）。PC活化组的IL-1β表达量（0.043±0.083）也在各组中最低，与PC组的表达量（0.319±0.059）比较，差异有统计学意义（P<0.05）；与对照组（0.146±0.070）、AD组（0.149±0.064）比较，差异无统计学意义（P>0.05）。结论1糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清可影响HUVEC的活性与形态，且高浓度的患者血清具有抑制HUVEC增殖的作用。2重组腺病毒Ad-FLT-1/PC能有效转染HUVEC细胞，并表达蛋白C，且具有良好的血管内皮细胞靶向性。3蛋白C经凝血酶活化后，可以有效对抗糖尿病肾病动脉粥样硬化患者血清造成的HUVEC凋亡、降低HUVEC分泌炎症因子水平而保护血管内皮细胞，为增强APC依赖的内皮细胞保护功能，防治糖尿病肾病动脉粥样硬化的策略提供了新思路。
罗亮[5]（2012）在《APC通过内质网应激抑制内皮细胞凋亡研究》文中研究说明背景与目的内毒素诱导ALI （endotoxin-induced acute lung injury）是当前呼吸危重病研究热点之一。内毒素可直接和间接导致肺血管内皮细胞的损伤与凋亡。近年来,活化蛋白C因具备抗凝、抗炎、抗凋亡、保护内皮屏障等多种生物学功能而用于严重脓毒血症治疗,并显着改善该类患者预后。研究证实,活化蛋白C抗凋亡作用与其参与线粒体凋亡途径以及死亡受体凋亡途径有关,但是内质网（endoplasmic reticulum, ER）是否也参与活化蛋白C的抗凋亡机制尚未见报道。本研究旨在探讨APC干预内皮细胞凋亡模型后,是否能够诱导ER应激及其与APC抗凋亡作用的关系,以及是否能够通过诱导ER应激而产生GSK-3β介导的抗凋亡效应,从而提出APC抗凋亡效应的新机制,为APC在内毒素诱导ALI干预治疗中的应用提供更多实验室依据。方法1.利用流式细胞仪及Caspase-3活性检测,观察不同剂量与时间的脂多糖（Lipopolysaccharide, LPS）刺激对HUVECs （human umbilical vein endothelial cell, HUVEC）凋亡的影响,构建LPS诱导的HUVECs凋亡模型；2.利用Western blot技术检测150nM APC干预HUVECs后糖调节蛋白78（glucose-regulated protein 78, GRP78）表达情况,利用流式细胞仪凋亡检测技术观察APC对LPS诱导HUVECs凋亡的影响；3.利用流式细胞仪检测技术及Caspase-3活性检测,观察ER钙离子释放阻滞剂TMB-8 （8-[N, N-diethyla-mino]-octyl-3,4,5-trimethoxy-benzoate, TMB-8）,对150nM APC抑制脂多糖（Lipopoly saccharide, LPS）诱导HUVECs凋亡的影响；4.利用Western blot检测技术,观察APC干预LPS诱导HUVECs凋亡后GSK-3β与p53蛋白的变化情况；5.利用RT-PCR与Western blot技术,对预先设计合成好的GSK-3p-siRNA进行验证；利用流式细胞仪检测技术观察沉默GSK-3β基因表达对APC抑制LPS诱导HUVECs凋亡作用的影响。结果（1）以0.1、1、10、20μg/ml LPS刺激HUVECs,可见0.1μg/ml LPS镜下观变化不易察觉,1、10、20μg/ml LPS均可导致显着的细胞形态变化,但10、20μg/mlLPS处理]HUVECs24小时后死亡明显增多；（2）采用150nM APC对LPS预处理24小时的HUVECs进行干预,6小时可见GRP78表达明显升高,并持续至24小时,各时间点GRP78表达与对照组比较均有统计学意义（P<0.05）,与单纯APC刺激HUVECsGRP78表达比较也具有统计学意义（P<0.05）; （3） LPS预处理HUVECs24小时后,同时给予150nM APC及50umol/L的TMB-8,6、12、24小时流式细胞仪检测结果中凋亡细胞比例以及Caspase-3活性检测与对照组比较均无统计学意义（P>0.05）。（4）1μg/ml LPS处理HUVECs24小时后GSK-3β表达略有增加,p53表达显着增加,在给予150nM APC干预后可见GSK-3β表达显着增加（P>0.05）,p53表达明显下降。（5）在GSK-3p-siRNA转染细胞中,Caspase-3活性及流式细胞仪检测结果均显示与GSK-3p正常表达细胞比较存在统计学意义（P<0.05）；而对GSK-3p-siRNA转染细胞给予APC干预后的Caspase-3活性检测结果与无APC干预的对照组比较无统计学意义（P>0.05）。结论本研究明确了APC可作为一种内质网应激原：（1）刺激内皮细胞产生的UPR,可能在APC抑制LPS诱导HUVECs凋亡中发挥细胞保护作用；（2）刺激HUVECs后诱导的短暂内质网源性钙离子释放,对LPS诱导IUVECs凋亡并未产生影响;（3）诱导产生内质网应激,并通过GSK-3β介导实现抑制LPS诱导的内皮细胞凋亡效应。
皮兴涛[6]（2011）在《APS患者血清对HUVEC粘附分子表达的影响及氟伐他汀干预作用》文中认为目的：探讨抗磷脂综合征（APS）患者血清对人脐静脉内皮细胞（HUVEC）细胞间粘附分子-1（ICAM-I）、E选择素（E-selectin）、血管内皮细胞粘附分子（VCAM-1）表达的影响及氟伐他汀的干预作用与机制。方法：采用酶消化法原代培养人脐静脉内皮细胞,倒置相差显微镜下观察细胞生长状态,通过Ⅷ因子免疫荧光法对培养细胞进行鉴定。选择生长良好的第3-4代细胞用于实验。分为（1）空白对照组：1640培养基；（2）APS浓度组：不同浓度的APS患者血清（10%、25%、50%、100%）培养细胞24h；（3）氟伐他汀浓度组：浓度为50%的APS患者血清加不同浓度氟伐他汀（2.5、5和10μmol/L）培养细胞24小时。甲羟戊酸组：浓度为50%的APS患者血清加不同浓度氟伐他汀（2.5、5和10μmol/L）和0.2mmol/L的甲羟戊酸培养HUVEC 24小时。各培养瓶中的细胞,经药物干预后收集细胞及培养上清液,采用RT-PCR技术测定细胞中的ICAM-I、E-selectin、VCAM-1 mRNA水平表达,抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）方法检测上清液中水平, Western-blot免疫印迹法检测各组细胞NF-κΒp65含量。结果：1.正常细胞生长良好,呈扁平多角形,边界清楚,胞质丰富,核圆形或椭圆形,随细胞密度增加呈现“铺路石样”排列；免疫荧光法证实内皮细胞特异Ⅷ因子相关抗原表达阳性。2.不同浓度的APS患者血清培养人脐静脉内皮细胞后,培养上清中（ICAM-I）、E-selectin、VCAM-1浓度及ICAM-I、E-selectin、VCAM-1 mRNA明显高于空白对照组,并呈浓度依赖性（P<0.05）。3.加入不同浓度的氟伐他汀干预,培养上清中的ICAM-I、E-selectin、VCAM-1浓度、细胞中ICAM-I、E-selectin、VCAM-1mRNA水平呈浓度依赖性下降,NF-kB p65含量变化趋势与各粘附分子浓度变化趋势一致（P<0.05）。4.加入甲羟戊酸后培养上清中的ICAM-I、E-selectin、VCAM-1浓度、细胞中ICAM-I、E-selectin、VCAM-1 mRNA水平、NF-kB p65含量与50%APS患者血清组无明显差异。结论：1.APS患者血清可以诱导HUVEC表达ICAM-I、E-selectin及VCAM-1。2.氟伐他汀可以抑制APS患者血清诱导的ICAM-I、E-selectin、VCAM-1表达增加,发挥抑制血栓形成,保护血管内皮的降脂外作用。3.氟伐他汀抑制APS患者血清诱导HUVEC表达ICAM-I、E-selectin、VCAM-1的作用可能是通过NF-kB途径实现的。
申玉英,徐小勇,张鹏鹏,张峰,施毅[7]（2010）在《烟曲霉感染后人脐静脉内皮细胞表达组织因子的变化》文中研究说明目的通过建立烟曲霉菌丝感染人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell,HUVEC）的体外模型,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达组织因子（tissue factor,TF）的变化,以及用不同干预因素处理对HUVEC表达TF的影响,以探讨侵袭性肺曲霉病（invansive pulmonary aspergillosis,IPA）血管侵袭的机制。方法实验分为6组,即对照组、肿瘤坏死因子α（tumor necrosis factor-α,TNF-α）组、烟曲霉菌丝组、细胞松弛素D组、N-cadherin抗体组和地塞米松组,分别于0、2、6、12、18h获取细胞冻融液,采用ELISA法检测TF浓度。结果实验组2、6、12、18h TF表达量与0h比较均升高(P（0.05）,而对照组则无明显变化;实验组TF表达量在2、6、12、18h高于对照组(P（0.05）;TNF-α组的TF表达量在2、6、12h高于烟曲霉菌丝组(P（0.01）;N-cadherin抗体组的TF表达量在2、6、12h低于烟曲霉菌丝组(P（0.05）;细胞松弛素D组或地塞米松组的TF表达量在各时间点与烟曲霉菌丝组比较差异均无统计学意义。结论烟曲霉菌丝感染后,HUVEC过度表达TF,N-cadherin单克隆抗体可减少TF的表达,而细胞松弛素D或地塞米松对TF的表达无明显影响。
申玉英[8]（2010）在《烟曲霉感染对HUVEC表达TF、vWF及细胞凋亡的影响》文中进行了进一步梳理目的：通过建立烟曲霉菌丝感染人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cell HUVEC）的体外模型,①观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达组织因子（tissue factor TF）和血管假性血友病因子（von Willebrand Factor vWF）的水平；②分别用细胞松弛素D、N-钙粘蛋白单克隆抗体或地塞米松处理HUVEC,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达TF和vWF的变化,以探讨侵袭性曲霉病血管侵袭的机制。方法：接种于24孔板的HUVEC长满融合后,加入预先配置的浓度为1×105CFU/ml烟曲霉菌丝悬液,建立烟曲霉菌丝感染血管内皮细胞模型。实验分为六组,每组总反应体积200μl,即①空白对照组：细胞不予任何刺激；②TNF-α组：细胞予TNF-α（浓度100 ng／ml）刺激；③烟曲霉菌丝组：烟曲霉菌丝悬液浓度为105 CFU/ml;④细胞松弛素D组：HUVEC长满融合后,实验前10min用细胞松弛素D溶液处理,加入配制好的烟曲霉菌丝悬液（细胞松弛素D终浓度为70 nmol/L,烟曲霉菌丝悬液浓度为105 CFU/ml）;⑤N-钙粘蛋白抗体组：HUVEC细胞长满融合,予浓度1：100的小鼠抗人N-钙粘蛋白单克隆抗体处理1h后,加入配制好的烟曲霉菌丝悬液（烟曲霉菌丝悬液浓度为105CFU/ml）;⑥地塞米松组：地塞米松和烟曲霉菌丝同时加入（地塞米松浓度为10-4mol／L,烟曲霉菌丝悬液浓度为105CFU/ml）。加入烟曲霉菌丝后,分别于共培养0、2、6、12、18h终止实验以获取细胞冻融液和2、6、12、18h提取细胞培养上清液,采用ELISA法分别检测TF、vWF浓度。结果：一、TF变化：除空白对照组外,各实验组HUVEC的TF表达量在2、6、12、18h与0h比较均升高（P<0.05）,而空白对照组则无明显变化；各组间0h的TF表达量差异无统计学意义；各实验组HUVEC的TF表达量在2、6、12、18h高于空白对照组（P<0.05）；TNF-α组HUVEC的TF表达量在2、6、12h分别为503.64±53.26ng/L、1272.60±186.38ng/L、908.97±133.11 ng／L,明显高于烟曲霉菌丝组相应时间点的387.33±57.05 ng／L、523.56±74.26ng／L、659.76±91.40 ng／L（P<0.01）；细胞松弛素D组与烟曲霉菌丝组比较,TF表达量在各时间点差异均无统计学意义；N-钙粘蛋白抗体组的TF表达量在2、6、12h分别为300.12±47.31ng/L.378.61±72.27ng/L、509.86±67.57ng/L,低于烟曲霉菌丝组相应时间点的387.33±57.05 ng/L.523.56±74.26 ng/L.659.76±91.40 ng/L（P<0.05）；地塞米松组与烟曲霉菌丝组比较,HUVEC的TF表达量在各时间点差异均无统计学意义。二、vWF变化：与2h比较,空白对照组和TNF-α组的vWF表达量在18h增加（P<0.05）,其余各组vWF表达量在6、12、18h均增加（P<0.05）；各实验组与空白对照组比较,除N-钙粘蛋白抗体组HUVEC的vWF表达量在2h无明显变化外,其余各时间点vWF表达量在2、6、12、18h均升高（P<0.05）；TNF-α组HUVEC的vWF表达量在2h为64.45±7.58ng/mL,高于烟曲霉菌丝组51.49±6.41 ng/mL（P<0.05）,而在18h为91.05±18.90 ng/mL,低于烟曲霉菌丝组133.73±19.49 ng/mL（P<0.05）；细胞松弛素D组HUVEC的vWF表达量与烟曲霉菌丝组比较在各时间点差异均无统计学意义；N-钙粘蛋白抗体组HUVEC的vWF表达量在2h、6h分别为38.95±6.26 ng/mL和61.99±5.41 ng/mL,低于烟曲霉菌丝组相应时间点的51.49±6.41ng/mL和78.66±10.43 ng/mL（P<0.05）；地塞米松组与烟曲霉菌丝组vWF表达量在各时间点差异均无统计学意义。结论：本实验结果提示：①建立烟曲霉菌丝感染HUVEC的体外模型是可行的；②烟曲霉菌丝感染造成HUVEC损伤,过度表达TF和vWF；③细胞松弛素D对烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达TF及vWF无明显影响；④N-钙粘蛋白单克隆抗体可抑制烟曲霉菌丝感染后HUVEC表达TF及vWF；⑤地塞米松对烟曲霉菌丝感染的HUVEC表达TF及vWF无明显影响。第二部分烟曲霉菌丝诱导HUVEC凋亡目的：应用烟曲霉菌丝感染HUVEC体外模型,观察烟曲霉菌丝感染后HUVEC的凋亡情况。方法：建立烟曲霉菌丝感染HUVEC的体外模型（具体同第一部分）。实验分三组：①空白对照组,细胞不予任何刺激；②烟曲霉菌丝组I（浓度105CFU/mL）；③烟曲霉菌丝组Ⅱ（浓度106CFU/ml）.用流式细胞仪于2、4、8h三个时相点检测HUVEC凋亡率。结果：除空白对照组外,暴露于烟曲霉菌丝组Ⅰ和Ⅱ的HUVEC凋亡率在2、4、8h逐渐增加（P<0.05）；烟曲霉菌丝组I2、4、8h的HUVEC凋亡率分别为9.76±1.47%、13.47±1.83%、20.08±2.36%,明显高于空白对照组相应时间点的1.61±0.17%、1.72±0.16%、1.84±0.18%（P<0.01）；烟曲霉菌丝组Ⅱ2、4、8 h的HUVEC凋亡率分别为12.25±1.44%、16.57±2.28%、24.31±3.37%,也明显高于空白对照组相应时间点的HUVEC凋亡率（P<0.01）,且高浓度烟曲霉菌丝引起细胞凋亡率高于低浓度烟曲霉菌丝（P<0.05）。结论：烟曲霉菌丝可诱导HUVEC凋亡。一定时间内,随HUVEC接触菌丝时间的延长,凋亡率增加；相同时间点,烟曲霉菌丝浓度越高,HUVEC凋亡率越高。
周怡[9]（2010）在《抵抗素对人脐静脉内皮细胞组织因子及其途径抑制物表达的调节》文中指出背景近年来以中心性肥胖、胰岛素抵抗为主要特征的代谢综合征（metabolic syndrome, MetS）发病率逐年升高。代谢综合征患者处于血栓前状态,直接增加动静脉血栓发病风险,但发病机制尚未完全阐明。组织因子（tissue factor, TF）是外源性凝血启动的关键因子,组织因子途径抑制物（tissue factor pathway inhibitor, TFPI）是目前发现的体内最强的生理性抗凝物质,是TF直接的生理性抑制物,在调节TF诱导的血栓形成中发挥重要作用。本实验观察脂肪细胞因子之一的抵抗素（resistin, R）对TF及TFPI的调节作用,从对凝血与抗凝系统活性因子的调节角度探讨代谢综合征患者易患血栓性疾病的原因及机制。目的体外培养人脐静脉内皮细胞（human umbilical vein endothelial cells, HUVECs）,观察不同浓度不同时间抵抗素处理后TF和TFPI蛋白及mRNA表达的变化,并探讨抵抗素是否能够通过细胞外信号调节激酶（extracellular signal-regulated kinases, ERK）、c-Jun氨基末端激酶（the c-Jun NH2-terminal kinases, JNKs）及丝裂原活化蛋白激酶p38（p38 MAPK）通路来调节人脐静脉内皮细胞TFPI的表达。方法（1）将体外培养的4-5代人脐静脉内皮细胞（HUVECs）分为单纯培养基对照组、不同浓度抵抗素（10ng/mL、25ng/mL、50ng/mL、100ng/mL）组,培养48h后,1)MTT法检测细胞活性;2)ELISA法测各组细胞裂解产物中的TF蛋白含量及上清液中总TFPI蛋白含量,real-time RT-PCR检测各组TF mRNA及TFPI mRNA表达;（2）将HUVECs 4-5代分为单纯培养基对照组、抵抗素（50ng/mL）组、ERK磷酸化抑制剂PD98059（10μmol/L）组、JNK磷酸化抑制剂SP600125（2.5μmol/L）组、p38磷酸化抑制剂SB20358（010μmol/L）组及各组抑制剂预处理组,分别培养48h后用ELISA法测各组细胞上清液中总TFPI蛋白含量。结果（1）各浓度抵抗素对HUVECs的细胞活力没有明显影响（p>0.05）;（2）25ng/mL及50ng/mL抵抗素在6h可显着增加TF蛋白的水平（p<0.05）,以50ng/mL作用最显着,24h和48h没有明显影响（p>0.05）,50ng/mL抵抗素对HUVECs表达TF mRNA无明显作用（p>0.05）;（3）50ng/mL抵抗素在24h,25ng/mL、50ng/mL及100ng/mL抵抗素在48h可显着降低TFPI蛋白水平（p<0.05）,以48h 50ng/mL作用最显着,但50ng/mL抵抗素对TFPI mRNA表达无明显影响（p>0.05）;（4）ERK、JNK、p38抑制剂预处理组TFPI蛋白水平与50ng/mL抵抗素单独作用组相比无明显升高。结论抵抗素可通过增加HUVECs的TF蛋白表达,抑制TFPI蛋白的水平,促进血栓形成;但不是通过对TF、TFPI基因表达水平的调节实现的,其具体调控机制有待进一步研究。
张文信[10]（2009）在《活血通络汤对深静脉血栓形成中血管内皮细胞保护作用的研究》文中进行了进一步梳理目的:研究活血通络汤在防治下肢深静脉血栓形成中的作用机理,主要从保护血管内皮细胞这一角度来探讨活血通络汤在下肢深静脉血栓形成中的干预机制,为临床治疗提供客观依据。方法:通过结扎下腔静脉下端与双侧髂总静脉建立大鼠深静脉血栓形成模型,研究活血通络汤对大鼠一般状态和双后肢肿胀情况,静脉血栓形成情况,炎症反应情况,血管内皮细胞损伤情况等的影响。通过建立二甲苯所致小鼠耳廓肿胀急性炎症模型,研究活血通络汤的对耳廓肿胀度的抑制作用。通过H2O2诱导人脐静脉内皮细胞建立体外血管内皮细胞氧化损伤模型,以及通过建立体外血管内皮细胞缺糖损伤模型,进行细胞形态学观察,LDH、NO和MDA的测定,细胞凋亡检测,研究活血通络汤对血管内皮细胞的保护作用。结果:在大鼠深静脉血栓形成模型实验中,模型组大鼠的一般状态,双后肢肿胀情况以及静脉血管病理形态学改变较假手术组程度重,其炎细胞浸润,血管内皮损伤严重。活血通络汤组大鼠的一般状态,双后肢肿胀情况以及静脉血管病理改变均有所改善。在小鼠耳廓肿胀急性炎症模型实验中,活血通络汤具有抑制耳廓肿胀度的作用。在体外血管内皮细胞氧化损伤、缺糖损伤模型实验中,活血通络汤用药组多数细胞形态没有出现明显的改变,细胞数量没有明显减少现象,LDH、MDA含量与模型组比较有明显减小,活血通络汤干预后的HUVEC凋亡小体数量有较明显的减少。在体外血管内皮细胞缺糖损伤模型实验中,活血通络汤用药组整体的细胞生长情况好于模型组。结论:静脉结扎法可以有效建立深静脉血栓形成模型。深静脉血栓形成与血管内皮细胞损伤有相关性。活血通络汤可以抑制炎细胞浸润,保护血管内皮细胞,减少血栓形成,能清除氧自由基,减少细胞凋亡,对氧化损伤诱导的血管内皮细胞具有保护作用,对缺糖损伤诱导的血管内皮细胞具有保护作用。活血通络汤的作用效果与剂量有一定的量效关系。活血通络汤剂量越高,作用效果越明显。中药可能通过保护血管内皮细胞达到防治下肢深静脉血栓形成的作用。
二、地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响（论文开题报告）
（1）论文研究背景及目的
此处内容要求：
首先简单简介论文所研究问题的基本概念和背景，再而简单明了地指出论文所要研究解决的具体问题，并提出你的论文准备的观点或解决方法。
写法范例：
本文主要提出一款精简64位RISC处理器存储管理单元结构并详细分析其设计过程。在该MMU结构中,TLB采用叁个分离的TLB,TLB采用基于内容查找的相联存储器并行查找,支持粗粒度为64KB和细粒度为4KB两种页面大小,采用多级分层页表结构映射地址空间,并详细论述了四级页表转换过程,TLB结构组织等。该MMU结构将作为该处理器存储系统实现的一个重要组成部分。
（2）本文研究方法
调查法：该方法是有目的、有系统的搜集有关研究对象的具体信息。
观察法：用自己的感官和辅助工具直接观察研究对象从而得到有关信息。
实验法：通过主支变革、控制研究对象来发现与确认事物间的因果关系。
文献研究法：通过调查文献来获得资料，从而全面的、正确的了解掌握研究方法。
实证研究法：依据现有的科学理论和实践的需要提出设计。
定性分析法：对研究对象进行“质”的方面的研究，这个方法需要计算的数据较少。
定量分析法：通过具体的数字，使人们对研究对象的认识进一步精确化。
跨学科研究法：运用多学科的理论、方法和成果从整体上对某一课题进行研究。
功能分析法：这是社会科学用来分析社会现象的一种方法，从某一功能出发研究多个方面的影响。
模拟法：通过创设一个与原型相似的模型来间接研究原型某种特性的一种形容方法。
三、地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响（论文提纲范文）
（1）VWF-A2对创伤性脑损伤神经保护作用及机制研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 缩略语/符号说明 |
| 前言 |
| 研究现状、成果 |
| 研究目的、方法 |
| 一、人重组VWF-A2蛋白表达、纯化及功能鉴定 |
| 1.1 对象和方法 |
| 1.1.1 实验仪器与设备 |
| 1.1.2 实验试剂与耗材 |
| 1.1.3 实验溶液的配制 |
| 1.1.4 实验方法 |
| 1.1.5 统计分析 |
| 1.2 结果 |
| 1.2.1 VWF-A2蛋白诱导与表达鉴定 |
| 1.2.2 VWF-A2蛋白纯化与鉴定 |
| 1.2.3 VWF-A2蛋白浓度检测 |
| 1.2.4 VWF-A2蛋白功能鉴定 |
| 1.3 讨论 |
| 1.4 小结 |
| 二、VWF-A2减轻TBI后血脑屏障破坏及神经功能损害 |
| 2.1 对象和方法 |
| 2.1.1 实验动物 |
| 2.1.2 实验仪器与设备 |
| 2.1.3 实验试剂与耗材 |
| 2.1.4 实验方法 |
| 2.1.5 统计分析 |
| 2.2 结果 |
| 2.2.1 VWF-A2降低TBI小鼠死亡率,改善神经功能预后 |
| 2.2.2 VWF-A2减少TBI后携带VWF的BDMVs释放 |
| 2.2.3 VWF-A2减轻TBI后血脑屏障渗漏及内皮细胞激活 |
| 2.2.4 VWF-A2减轻TBI后肺组织毛细血管渗漏 |
| 2.2.5 VWF-A2减轻MV介导的体外内皮屏障渗漏及内皮细胞激活 |
| 2.3 讨论 |
| 2.4 小结 |
| 三、VWF-A2减轻TBI后凝血系统功能障碍 |
| 3.1 对象和方法 |
| 3.1.1 实验动物 |
| 3.1.2 实验仪器与设备 |
| 3.1.3 实验试剂与耗材 |
| 3.1.4 实验方法 |
| 3.1.5 统计分析 |
| 3.2 结果 |
| 3.2.1 VWF-A2降低TBI后VWF抗原水平及粘附活性 |
| 3.2.2 VWF-A2减轻TBI后血小板激活及血小板减少症 |
| 3.2.3 VWF-A2减轻TBI后MV介导的凝血功能障碍 |
| 3.2.4 VWF-A2减轻TBI后纤溶系统功能亢进 |
| 3.2.5 VWF-A2减轻TBI后肾脏纤维素沉积 |
| 3.2.6 VWF-A2减轻TBI后出血倾向 |
| 3.3 讨论 |
| 3.4 小结 |
| 四、VWF-A2结合并抑制TBI后高活性VWF功能 |
| 4.1 对象和方法 |
| 4.1.1 实验动物 |
| 4.1.2 实验仪器与设备 |
| 4.1.3 实验试剂与耗材 |
| 4.1.4 实验方法 |
| 4.1.5 统计分析 |
| 4.2 结果 |
| 4.2.1 VWF-A2可在体内、体外与活化的VWF结合 |
| 4.2.2 VWF-A2可与VWF-A1结合 |
| 4.2.3 VWF-A2抑制VWF介导的血小板聚集 |
| 4.2.4 VWF-A2抑制血栓形成 |
| 4.3 讨论 |
| 4.4 小结 |
| 全文结论 |
| 论文创新点 |
| 参考文献 |
| 发表论文和参加科研情况说明 |
| 综述 创伤性脑损伤相关凝血功能障碍的研究进展 |
| 综述参考文献 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（2）西格列汀通过抑制自噬过程改善高糖造成的血管内皮损伤（论文提纲范文）
| 中英文缩略词表 |
| 中文摘要 |
| Abstract |
| 引言 |
| 第一部分 西格列汀在糖尿病大鼠大血管内皮损伤中的作用及机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第二部分 西格列汀在高糖培养人脐静脉内皮细胞中的作用及机制 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 第三部分 西格列汀通过抑制自噬保护高糖培养下人脐静脉内皮细胞 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 结论 |
| 本文的创新性和局限性 |
| 参考文献 |
| 综述 |
| 参考文献 |
| 学位论文答辩委员会名单 |
| 个人简历 |
| 致谢 |
（3）香芪汤对内毒素血症小鼠凝血因子的影响（论文提纲范文）
| 摘要 |
| Abstract |
| 缩写词表 |
| 第一篇 选题背景与文献综述 |
| 第一章 选题背景 |
| 第二章 文献综述 |
| 1 内毒素血症的研究进展 |
| 1.1 内毒素血症的分类 |
| 1.2 内毒素的作用机制 |
| 1.3 内毒素血症的治疗方法 |
| 2 凝血反应的研究进展 |
| 2.1 炎症反应促发凝血反应 |
| 2.2 凝血反应加重炎症反应 |
| 2.3 抗凝血反应拮抗炎症反应 |
| 3 香芪汤及组成其单味中药的研究近况 |
| 3.1 香附 |
| 3.2 黄芪 |
| 3.3 穿心莲 |
| 第二篇 研究内容 |
| 第一章 内毒素血症模型的建立 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 主要仪器 |
| 1.3 主要试剂 |
| 1.4 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 小鼠一般情况 |
| 2.2 LPS对小鼠直肠体温的影响 |
| 2.3 LPS对小鼠脏器指数的影响 |
| 2.4 LPS对小鼠炎性因子表达的影响 |
| 2.5 LPS对小鼠胸主动脉EPCR表达的影响 |
| 3 分析与讨论 |
| 小结 |
| 第二章 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠凝血因子的影响 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 主要试剂与药品 |
| 1.3 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 小鼠一般情况 |
| 2.2 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠直肠体温的影响 |
| 2.3 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠sAPP表达的影响 |
| 2.4 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠TF、sEPCR、tPA表达的影响 |
| 3 分析与讨论 |
| 小结 |
| 第三章 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠作用机理初探 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 试验动物 |
| 1.2 主要试剂 |
| 1.3 试验方法 |
| 2 试验结果 |
| 2.1 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠ADAM17表达的影响 |
| 2.2 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠MAPKs表达的影响 |
| 2.3 香芪汤及其单味中药对内毒素血症小鼠PKC delta表达的影响 |
| 3 分析与讨论 |
| 小结 |
| 第三篇 结论与创新性 |
| 参考文献 |
| 致谢 |
| 附图 |
（4）重组蛋白C的靶向设计及其对内皮细胞的保护作用研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述：蛋白 C 系统及活化蛋白 C 的临床作用 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 攻读学位期间发表文章情况 |
| 致谢 |
| 个人简历 |
（5）APC通过内质网应激抑制内皮细胞凋亡研究（论文提纲范文）
| 前言 |
| 摘要 |
| Abstract |
| 中英文全称及缩写一览表 |
| 第一章 绪论 |
| 1 内毒素诱导的内皮细胞凋亡 |
| 1.1 内毒素与内毒素血症 |
| 1.2 内毒素与炎症反应 |
| 1.3 内毒素诱导内皮细胞凋亡 |
| 1.4 内毒素诱导急性肺损伤 |
| 2. 活化蛋白C特性与应用 |
| 2.1 活化蛋白C及其受体分子结构 |
| 2.2 活化蛋白C生物学特性 |
| 2.3 活化蛋白C变构体与生物学功能改造 |
| 2.4 活化蛋白C的临床应用 |
| 3 内质网应激对内皮细胞的影响 |
| 3.1 内质网应激原 |
| 3.2 内质网应激与未折叠蛋白反应 |
| 3.3 内质网应激与细胞凋亡 |
| 3.4 内质网钙离子释放与细胞凋亡 |
| 4 活化蛋白C与内毒素诱导的内皮细胞凋亡研究中存在的问题 |
| 参考文献 |
| 第二章 脂多糖诱导人脐静脉内皮细胞凋亡模型构建 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第三章 活化蛋白C诱导内质网未折叠蛋白反应抑制HUVECs凋亡 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第四章 内质网钙释放阻滞剂对活化蛋白C抗凋亡作用的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第五章 活化蛋白C对人脐静脉内皮细胞GSK-3β与p53蛋白的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 第六章 GSK-3β-siRNA对活化蛋白C抗凋亡作用的影响 |
| 引言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 小结 |
| 参考文献 |
| 结论 |
| 致谢 |
（6）APS患者血清对HUVEC粘附分子表达的影响及氟伐他汀干预作用（论文提纲范文）
| 摘要 |
| ABSTRACT |
| 英文缩略语表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述1 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 综述2 |
| 正文 |
| 参考文献 |
| 个人简介 |
| 致谢 |
（7）烟曲霉感染后人脐静脉内皮细胞表达组织因子的变化（论文提纲范文）
| 0 引 言 |
| 1 材料与方法 |
| 1.1 主要试剂和仪器 |
| 1. 2 烟曲霉菌丝的制备 |
| 1.3 细胞培养和计数 |
| 1.4 实验分组 |
| 1.5 ELISA法检测TF抗原 |
| 1.6 统计学分析 |
| 2 结 果 |
| 3 讨 论 |
（8）烟曲霉感染对HUVEC表达TF、vWF及细胞凋亡的影响（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 第一部分 烟曲霉刺激HUVEC表达TF、vWF的影响 |
| 背景 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 第二部分 烟曲霉菌丝诱导HUVEC凋亡 |
| 背景 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 全文总结 |
| 参考文献 |
| 文献综述 |
| 致谢 |
（9）抵抗素对人脐静脉内皮细胞组织因子及其途径抑制物表达的调节（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 缩略词表 |
| 前言 |
| 材料与方法 |
| 结果 |
| 讨论 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 综述1 |
| 综述2 |
| 致谢 |
| 硕士生学习期间发表论文及学术活动 |
| 个人简历 |
（10）活血通络汤对深静脉血栓形成中血管内皮细胞保护作用的研究（论文提纲范文）
| 中文摘要 |
| 英文摘要 |
| 第一章 绪论 |
| 第一节 本研究目的、意义及设计 |
| 第二节 现代医学对下肢深静脉血栓形成的认识 |
| 1 病因及发病机制 |
| 2 危险因素 |
| 3 诊断 |
| 4 治疗 |
| 第三节 祖国医学对下肢深静脉血栓形成的认识 |
| 1 病因病机 |
| 2 治疗 |
| 第二章 活血通络汤的实验研究 |
| 第一节 活血通络汤对结扎型大鼠深静脉血栓的影响 |
| 1 实验材料 |
| 2 统计方法 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第二节 活血通络汤对小鼠耳廓肿胀的实验研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 统计方法 |
| 3 实验方法 |
| 4 实验结果 |
| 第三节 活血通络汤对内皮细胞氧化损伤的保护作用研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 第四节 活血通络汤对内皮细胞缺糖损伤的保护作用研究 |
| 1 实验材料 |
| 2 实验方法 |
| 3 实验结果 |
| 第三章 讨论 |
| 第一节 深静脉血栓形成动物模型的选择和建立 |
| 1 有关深静脉血栓形成动物模型的研究综述 |
| 2 本课题动物模型的建立 |
| 第二节 体外血管内皮细胞损伤模型的建立及研究 |
| 第三节 活血通络汤防治下肢深静脉血栓形成的处方依据 |
| 1 活血通络汤的治则确立 |
| 2 活血通络汤的方药分析 |
| 3 活血通络汤方药的现代药理学研究 |
| 第四节 活血通络汤防治深静脉血栓形成的干预机制探讨 |
| 1 活血通络汤能抑制炎性细胞的浸润,减少血栓形成,保护血管内皮细胞 |
| 2 活血通络汤能降低自由基,减少细胞凋亡,对氧化诱导的内皮细胞具有保护作用 |
| 3 活血通络汤对缺糖损伤诱导的血管内皮细胞具有保护作用 |
| 结论 |
| 参考文献 |
| 附录 |
| 致谢 |
| 作者简介 |
四、地塞米松对内毒素作用下人脐静脉内皮细胞表达组织因子、凝血酶调节蛋白和蛋白S的影响（论文参考文献）
- [1]VWF-A2对创伤性脑损伤神经保护作用及机制研究[D]. 徐新. 天津医科大学, 2019(02)
- [2]西格列汀通过抑制自噬过程改善高糖造成的血管内皮损伤[D]. 常鑫淼. 北京协和医学院, 2019(02)
- [3]香芪汤对内毒素血症小鼠凝血因子的影响[D]. 张玉婷. 四川农业大学, 2016(04)
- [4]重组蛋白C的靶向设计及其对内皮细胞的保护作用研究[D]. 张亚玲. 川北医学院, 2012(08)
- [5]APC通过内质网应激抑制内皮细胞凋亡研究[D]. 罗亮. 南京大学, 2012(07)
- [6]APS患者血清对HUVEC粘附分子表达的影响及氟伐他汀干预作用[D]. 皮兴涛. 山西医科大学, 2011(08)
- [7]烟曲霉感染后人脐静脉内皮细胞表达组织因子的变化[J]. 申玉英,徐小勇,张鹏鹏,张峰,施毅. 医学研究生学报, 2010(12)
- [8]烟曲霉感染对HUVEC表达TF、vWF及细胞凋亡的影响[D]. 申玉英. 第二军医大学, 2010(10)
- [9]抵抗素对人脐静脉内皮细胞组织因子及其途径抑制物表达的调节[D]. 周怡. 汕头大学, 2010(05)
- [10]活血通络汤对深静脉血栓形成中血管内皮细胞保护作用的研究[D]. 张文信. 南京中医药大学, 2009(06)